Jurnal MediLab Mandala Waluya Vol 7 No 1. Juli 2023 Website : http//:analiskesehatan-mandalawaluya. id/ index. php/JMMedila. DOI : https://doi. org/10. 36566/medilab. v5i1 juli. p-ISSN : 2580-4073 e-ISSN: 2685-1113 MUTASI GEN TMPRSS 6 TERHADAP KADAR HEMOGLOBIN PADA PETANI PADI YANG TERPAPAR PESTISIDA DI DESA TANGGONDIPO KECAMATAN UEPAI KABUPATEN KONAWE Titi Purnama3 . Tasman2 ,Trisnawati3. Email: titipurnam@gmail. com, tasman@gmail. 1,2,3 D-IV Teknologi Laboratorium Medis Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Mandala Waluya ABSTRAK Dinas Kesehatan Sulawesi Tenggara menggambarkan prevalensi anemia sebesar 67,3%, antara lain disebabkan oleh asupan gizi yang masih rendah. Jenis penelitian yang dilakukan adalah Kuantitatif dengan rancangan penelitian cross Populasi pada penelitian ini adalah 8 orang. Teknik pengambilan sampel dilakukan dengan pengukuran kadar hemoglobin dengan jumlah sampel 7 responden. Pada penelitian ini sampel yang digunakan terdiri dari darah EDTA untuk mengukur kadar hemoglobin dan serum petani padi untuk mendeteksi mutasi gen TMPRSS 6. Hasil penelitian mutasi gen TMPRSS 6 pada petani yang memiliki kadar hemoglobin rendah di Puskesmas Uepai adalah genotipe CC . %). Genotipe CT . %) terdapat pada sampel 1, 2, 3 dan 7 ditandai dengan munculnya pita berukuran 331 bp, 225 bp dan 151 bp. Genotipe TT . 85%) terdapat pada sampel 4, 5 dan 6 yang ditandai dengan muncul pita berukuran 331 dan 151 bp. Berdasarkan penelitian ini dapat disimpulkan bahwa semua petani padi yang memiliki kadar hemoglobin rendah membawa alel T yang merupakan faktor resiko terjadinya anemia. Penelitian selanjutnya disarankan untuk melakukan sekuensing DNA untuk mengetahui jenis mutasi DNA gen TMPRSS 6 yang terjadi. Kata Kunci Kadar : Hemoglobin,TMPRSS 6, rs855791. Desa Tanggondipo Jurnal MediLab Mandala Waluya Vol 7 No 1. Juli 2023 Website : http//:analiskesehatan-mandalawaluya. id/ index. php/JMMedila. DOI : https://doi. org/10. 36566/medilab. v5i1 juli. p-ISSN : 2580-4073 e-ISSN: 2685-1113 darah merah, hal ini membuat terbentuknya PENDAHULUAN Anemia adalah keadaan dimana terjadi methemoglobin di dalam sel darah merah. Hal ini menyebabkan hemoglobin menjadi ditunjukkan oleh penurunan kadar hemoglobin, tidak normal dan tidak dapat menjalankan dan hitung eritrosit Nasruddin (Hermiaty Health Kehadiran methemoglobin dalam darah Organization menyebutkan bahwa kurang lebih akan menyebabkan penurunan kadar hb di 50% penyebab dari kejadian anemia adalah dalam sel darah merah sehingga terjadi defisiensi zat besi. Pada kondisi ini,terjadi anemia (Lestari dkk. ,2. World Penelitian pada petani hortikultura di kekurangan cadangan zat besi dalam tubuh atau yang disebut dengan iron depleted state (Ghea Desa dkk,2. Kabupaten Hasil Survei 21,7% Kecamatan Pemalang Belik Nasional didapatkan 19 petani . ,5%) mengalami keracunan akibat pestisida dan 17 petani Kesehatan Indonesia 2013 terdapat Gombong dengan kadar hemoglobin kurang dari batas . ,5%) normal yakni sebesar 18,4% laki-laki dan keracunan akibat pestisida dan anemia pada petani di Desa Gombong dapat dipengaruhi 23,9% Berdasarkan tahun dengan kadar Hb kurang dari 12 g/dl. maupun perilaku petani itu sendiri. Hal (Nella Mutia dkk,2. serupa penelitian yang dilakukan oleh Rangaan India Kejadian kelompok usia, 18,4% pada rentang usia 15-25 Pestisida secara umum diartikan sebagai bahan kimia beracun yang digunakan untuk didapatkan pengaruh pestisida terhadap kadar hemoglobin, merugikan manusia. Penggunaan pestisida yang berlebihan akan menimbulkan dampak negatif penghancuran sel darah merah. Hal ini yang membuat pembentukan methemoglobin di yaitu menyebabkan Terpaparnya tubuh oleh pestisida berdampak pada komponen yang ada di dalam hemoglobin menjadi tidak normal dan juga tubuh manusia, salah satunya adalah darah. tidak dapat menjalankan fungsinya dalam Pengaruh pestisida dalam kadar hemoglobin dimana pestisida ini menyebabkan penurunan produksi atau peningkatan penghancuran sel menyebabkan penurunan kadar Hb di dalam Kehadiran Jurnal MediLab Mandala Waluya Vol 7 No 1. Juli 2023 Website : http//:analiskesehatan-mandalawaluya. id/ index. php/JMMedila. DOI : https://doi. org/10. 36566/medilab. v5i1 juli. p-ISSN : 2580-4073 e-ISSN: 2685-1113 Penelitian-penelitian terdahulu telah sel darah merah sehingga terjadi anemia (Kurniasih dkk, 2. dilakukan oleh Nasira et. , 2021 telah Menurut penelitian Dian Purwanto melakukan penelitian tentang Role of . bahwa regulator utama dari metabolisme TMPRSS6 rs855791 (T > C) polymorphism zat besi adalah hepcidin. Sintesis hepsidin in reproductive age women with iron dikontrol oleh aktivitas eritropoiesis sumsum deficiency anemia from Lahore. Pakistan tulang, penyimpanan zat besi dan adanya diperoleh hasil polymorfisme TMPRSS 6 inflamasi dalam tubuh. Produksi hepsidin yang rs855791 (TC) berkaitan erat berlebihan dipengaruhi oleh adanya mutasi gen penderita IDA pada wanita usia produktif TMPRSS 6 . seperti yang telah diamati pada model Mutasi TMPRSS kodominan dan model resesif, selain itu menyebabkan anemia defisiensi refraktori besi juga Maria et. , 2008 A mutation in the (IRIDA) yang tidak responsif tehadap terapi besi TMPRSS6 gene, encoding a transmembrane IRIDA juga ditandai dengan hipokromik serine protease that suppresses hepcidin kongenital, anemia mikrositik, volume eritrosit production, in familial iron deficiency rendah dan saturasi transferin rendah (Chia anemia refractory to oral iron diperoleh , 2. hasil bahwa mutasi TMPRSS 6 yang Baru-baru TMPRSS diamati menyebabkan produksi hepcidin diidentifikasi sebagai pengubah homeostatis besi karena mengatur ekspresi hormon pengatur gangguan penyerapan dan pemanfaatan zat besi sistemik hepcidin dan menghambat aktivasi Hepcidin mengontrol penyerapan zat besi dengan mengikat satu persatu protein METODE PENELITIAN Jenis penelitian yang dilakukan adalah ekspor besi seluler yang diketahui feroportin Kuantitatif dengan rancangan sehingga menyebabkan degradasi feroportin dan cross sectional. Populasi dalam penelitian ini penyumbatan sirkulasi zat besi dari eritrosit. adalah 8 orang. Teknik pengambilan sampel Selain itu, hepcidin memblokir transfer zat besi Pada penelitian ini sampel yang digunakan terdiri dari darah EDTA untuk pemanfaatan kembali sel darah mengukur kadar hemoglobin dan serum Jurnal MediLab Mandala Waluya Vol 7 No 1. Juli 2023 Website : http//:analiskesehatan-mandalawaluya. id/ index. php/JMMedila. DOI : https://doi. org/10. 36566/medilab. v5i1 juli. p-ISSN : 2580-4073 e-ISSN: 2685-1113 petani padi untuk mendeteksi mutasi gen (Tahu. TMPRSS 6. HASIL Karakteristik Responden . Karakteristik Responden Ou10 Berdasarkan Umur Berdasarkan tabel 2 dapat diketahui bahwa lama penggunaan pestisida oleh Berdasarkan observasi data hasil penelitian <10 berdasarkan umur ditunjukan pada tabel 1. Tabel 1. Responden Berdasarkan Umur di Puskesmas Uepai Tahun 2022. 4 orang responden dengan presentase . ,14%) dan penggunaan pestisida >10 tahun sebanyak 3 orang dengan presentase . 85%). Jumlah Presentasi (%) . Hasil pengukuran konsentrasi DNA sampel responden yang memiliki kadar Hb Umur . responden >10 tahun penggunaan sebanyak Hasil pengukuran konsentrasi DNA rendah di Puskesmas Uepai dapat dilihat pada tabel 6. Berdasarkan tabel 1 dapat diketahui bahwa Tabel 3. Hasil uji kualitas dan kuantitas responden yang berumur 35-44 tahun DNA ,85%), responden yang berumur 45-54 Sam Konsentrasi tahun sebanyak 4 orang dengan presentase DNA A 260 A 280 Ratio (A 260/ /mL) . ,14%). Karakteristik Responden Berdasarkan Lama Penggunaan Pestisida Berdasarkan observasi data hasil penelitian yang A. dilakukan, jumlah responden berdasarkan lama penggunaan pestisida ditunjukan pada tabel 2. Lama Pengguna Jumlah Presentasi (%) Hasil Deteksi Mutasi Gen TMPRSS 6 Pestisida Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, diperoleh hasil deteksi mutasi Jurnal MediLab Mandala Waluya Vol 7 No 1. Juli 2023 Website : http//:analiskesehatan-mandalawaluya. id/ index. php/JMMedila. DOI : https://doi. org/10. 36566/medilab. v5i1 juli. gen TMPRSS 6 pada petani padi yang memiliki p-ISSN : 2580-4073 e-ISSN: 2685-1113 membawa genotipe CT terdapat pada kadar Hb rendah dapat dilihat pada gambar 8. sampel 1, 2, 3 dan 7 dengan presentase . 14%) dan hasil mutasi gen TMPRSS 6 yang membawa genotipe TT terdapat pada sampel 4, 5 dan 6 dengan presentase . 85%). PEMBAHASAN Sampel penelitian ini adalah serum petani padi yang terpapar pestisida dan memiliki kadar Hb rendah di Puskesmas Uepai, berdasarkan tabel 4 dapat diketahui Gambar 1. Hasil elektroforesis terdapat pita bahwa responden yang berumur 35-44 transmembarn serin protease 6 pada penderita tahun sebanyak 3 orang dengan presentase . ,85%), responden yang berumur 45-54 Berdasarkan gambar 8 dapat diketahui tahun sebanyak 4 orang dengan presentase bahwa pada sampel 4,5 dan 6 terbentuk pita . ,14%). DNA yang berukuran 331 bp, 255 bp dan 151 kadar hemoglobin pada petani jika ditinjau bp, sedangkan pada sampel 1,2,3, dan 7 dari segi usia memiliki pengaruh yang terbentuk pita DNA berukuran 331 bp dan 151 Dalam penggunaan pestisida petani yang berada dalam rentang umur >50 Tabel 7. Hasil deteksi mutasi gen TMPRSS 6 pada petani padi yang memiliki kadar Hb Ditambah Kode Jum Presen sil PCR tase (%) 1, 2, 3,7 Peningkatan berpuluh-puluh tahun (Mahyuni, 2. Masa kontribusi untuk terjadinya anemia pada 4, 5, 6 Petani dengan masa kerja yang lama memiliki resiko yang lebih besar untuk Berdasarkan tabel 7 dapat diketahui bahwa hasil mutasi gen TMPRSS 6 yang terkena anemia (Arwin, 2. Berdasarkan tabel 5 dapat diketahui bahwa lama Jurnal MediLab Mandala Waluya Vol 7 No 1. Juli 2023 Website : http//:analiskesehatan-mandalawaluya. id/ index. php/JMMedila. DOI : https://doi. org/10. 36566/medilab. v5i1 juli. penggunaan pestisida oleh responden >10 tahun p-ISSN : 2580-4073 e-ISSN: 2685-1113 264 AAg/mL. Konsentrasi DNA yang penggunaan sebanyak 4 orang responden rendah dapat dipengaruhi oleh beberapa dengan presentase . ,14%) dan penggunaan pestisida >10 tahun sebanyak 3 orang dengan presipitasi DNA dari jaringan sel yang presentase . 85%). Dampak anemia pada kurang maksimal sehingga menyebabkan petani akan lebih besar apabila kontak dengan ekstraksi DNA dari dalam sel hanya sedikit. pestisida dilakukan dalam waktu yang lama Selain itu juga dapat disebabkan oleh setiap harinya ( Nurhayati Ramli, 2. pengikatan DNA yang kurang maksimal Beberapa faktor penyebab terjadinya (Arwin. Salah saat tahap binding DNA (Sulasmi, 2. anemia pada petani yaitu umur petani, lama Molekul DNA dikatakan murni jika rasio A260/A280 berkisar antara 1,8 Ae 2,0 (Mustafa. Pada penyebab anemia pada petani padi adalah sampel-sampel memiliki nilai kemurnian terjadinya mutasi gen tmprss6, hal ini sejalan lebih kecil dari 1,8 yang disebabkan oleh dengan penelitian ( Sheng Zhang, 2. bahwa DNA tmprss6 berperan dalam homeostatis zat besi di dalam tubuh. Mutasi gen ini dapat menyebabkan (Siswara, 2. Hal ini sejalan dengan perubahan struktur dan fungsi enzim matriptase- penelitian (Putri Ayu. bahwa nilai 2 yang mengakibatkan penurunan feroportin kemurnian DNA yaitu 1,8 Ae 2,0. Nilai rasio yang mengakibatkan kadar hepsidin meningkat. di bawah 1,8 terdapat kontaminan protein Feroportin berperan sebagai reseptor hepsidin. dalam DNA dan nilai rasio di atas 2,0 Ketika RNA Nilai menyebabkan zat besi di dalam tubuh berkurang dan mempengaruhi proses pembentukan sel kemurnian yang berada di bawah 1,8 eritrosit sehingga oksigen di dalam tubuh mengandung protein. Protein yang terdapat hemoglobin di dalam darah. Berdasarkan DNA pada hasil isolasi DNA dapat terjadi karena protein masih belum mengalami lisis konsentrasi DNA pada tabel 6, sampel yang dengan sempurna saat proses isolasi. Hal mempunyai konsentrasi DNA tertinggi adalah yang dapat dilakukan untuk memperoleh sampel 1 yaitu 86. 55 AAg/mL dan sampel hasil lisis yang sempurna adalah dengan konsentrasi paling rendah adalah sampel 3 yaitu Jurnal MediLab Mandala Waluya Vol 7 No 1. Juli 2023 Website : http//:analiskesehatan-mandalawaluya. id/ index. php/JMMedila. DOI : https://doi. org/10. 36566/medilab. v5i1 juli. menambah waktu inkubasi pada suhu 60 AC. p-ISSN : 2580-4073 e-ISSN: 2685-1113 dengan penelitian Joana . tentang Namun demikian. DNA yang tidak murni tidak anemia defisiensi besi refraktori besi karena akan mengganggu proses amplifikasi pada PCR. mutasi gen TMPRSS 6 terkait dengan Sehingga hasil isolasi tetap akan diproses dalam pengembangan ferropecic anemia. tahap selanjutnya yaitu PCR (Erwanto, 2. Pemurnian DNA Pada hasil penelitian deteksi mutasi gen TMPRSS 6 setelah gel agarose di penambahan Proteinase K berfungsi untuk Transluminator diperoleh hasil genotip TT mengkontaminasi DNA. Hal ini sejalan dengan pada sampel 4, 5, dan 6 yang ditandai dengan muncul pita berukuran 331 bp dan proteinase K bertujuan untuk mendegradasi 151 bp. Sementara itu hasil genotipe CT protein pada sel sehingga DNA dapat diisolasi pada sampel 1, 2, 3 dan 7 yang ditandai dengan baik dan tidak terkontaminasi oleh dengan muncul pita berukuran 331 bp, 225 protein sel. Proteinase K ini menyebabkan bp dan 151 bp. Pada sampel nomor 4, 5 dan 6 berumur 46 tahun, 45 tahun dan 48 tahun selanjutnya dipisahkan dengan cara sentrifugasi. dengan lama penggunaan pestisida >10 Proses sentrifugasi terbagi menjadi 2 fase yaitu Masa kerja memiliki kontribusi fase organik . apisan bawa. dan fase aquoeus untuk terjadinya anemia. apisan ata. DNA dan RNA berada di fase dengan penelitian Mutia . bahwa aquoeus sedangkan protein dan lipid berada anemia merupakan salah satu bentuk efek pada fase organik. Jika pada saat penambahan proteinase K kedua fase ini tidak terpisahkan penggunaan pestisida dalam waktu yang maka akan terjadi kontaminasi terhadap DNA lama dapat yang menyebabkan kuantitas DNA rendah. profil darah karena pestisida mengganggu (Widyastuti. Deteksi TMPRSS Polimerase Chain Reaction dari 7 sampel petani padi yang Hal ini sejalan menyebabkan abnormalitas organ pembentukan sel darah dan sistem Pada penelitian ini alel T pada memiliki kadar Hb rendah ditandai dengan Membrane mutasi penyebab anemia, karena dari 7 Protease Serin 6 dengan ukuran 331, 225 dan responden semuanya membawa alel T. Hal 151 bp setelah gel agarose di visualisasi ini sejalan dengan penelitian Yuliana diperoleh hasil SNP rs855791 DNA Trans Transluminator Jurnal MediLab Mandala Waluya Vol 7 No 1. Juli 2023 Website : http//:analiskesehatan-mandalawaluya. id/ index. php/JMMedila. DOI : https://doi. org/10. 36566/medilab. v5i1 juli. bersifat homozigot ataupun heterozigot dengan p-ISSN : 2580-4073 e-ISSN: 2685-1113 menambah ilmu dan bahan bacaan frekuensi subyek mutan . embawa alel T) pada penderita anemia defisiensi besi. Pada penelitian ini hasil visualisasi DNA Bagi peneliti selanjutnya, disarankan pada basa 331 bp tidak terlalu nampak. untuk melakukan sekuensing DNA Konsentrasi DNA yang terlalu rendah akan untuk mengetahui jenis mutasi gen menghasilkan fragmen yang sangat tipis pada TMPRSS 6 yang terjadi. gel ( Christin, 2. Keberadaan pita nonspesifik pada hasil PCR dapat disebabkan oleh DAFTAR PUSTAKA suhu anealing yang rendah . Untuk mengatasi Hermiaty dkk. Angka Kejadian Anemia Pada Remaja Indonesia. Vol 1 . : 357-364. Juni 2022. Ghea dkk. Gambaran Status Anemia Pada Remaja Putri Di Wilayah Pegunungan Dan Pesisir Pantai (Studi Di SMP Negeri Kecamatan Getasan Dan Semarang Bara. Vol 5 . : 2356-3346. 12 Agustus Nella & Suyud. Pajanan Pestisida Dan Kejadian Anemia Pada Petani Holtikultura Kecamatan Cikajang. Kabupaten Garut Tahun Vol 32 . : 245-250. 12 Juli Yhani. Hubungan Asupan Energi. Asupan Protein, dan Kadar Hemoglobin dengan Produktivitas Kerja Wanita Petani Kelurahan Tegalroso. Kabupaten Temanggung Tahun 2015. Vol 3 . : 2356-3346. 10 Januari 2022. Fauzyyah dkk. Studi Praktik Penggunaan Pestisida Dan Kejadian Anemia Pada Petani Buah Di Desa Tunggak Kecamatan Toroh Kabupaten Grobogan. Vol 5 . : 2356-3346. 19 Maret 2022. Lestari dkk. Faktor Risiko Dalam Penggunaan Pestisida Terhadap Keluhan Kesehatan Pada Petani Di Kecamatan Berastagi Kabupaten Karo 2014. Vol 9 . : 79 - 89. masalah yang muncul dapat dilakukan optimasi ulang dengan meningkatkan suhu anealing PCR yang digunakan (Joko, 2. KESIMPULAN Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa deteksi mutasi gen TMPRSS 6 pada ke-7 sampel yang berbeda didapatkan hasil positif genotipe CT pada denganadanya pita DNA pada ukuran 331 bp, 225 bp dan 151 bp. Dan genotip TT pada sampel nomor 4, 5 dan 6 yang ditandai dengan adanya pita DNA pada ukuran 331 bp dan 151 SARAN