Jurnal Kesehatan Bakti Tunas Husada
Volume 13 Nomor 1 Februari 2015
EFEKTIVITAS LACTOBACILLUS SPOROGENEUS TERHADAP PENURUNAN
INTOLERANSI GLUKOSA PADA MENCIT JANTAN GALUR SWISS WEBSTER
Yedy Purwandi Sukmawan Program Studi S1 Farmasi STIKes Bakti Tunas Husada.
Tasikmalaya
ABSTRACT
Problem health or Disease has change from infectious disease become degenerative disease.
This change stimulated by life style, environment and genetics.
Diabetes Mellitus is one of degenerative disease.
Therefore, researcher implement research to evaluated reduction glucose intolerance effect of Lactobacillus sporogenes.
Test Group Male swiss webster mice given orally Lactobacillus sporogenes suspension for 7 days with dosage used are 12 x 10 6/Kg BW, 24 x 106/Kg BW and 48x 106/Kg BW.
Afterward, given dexamethason .
mg /Kg BW) intraperitoneally for 4 days.
Reduction blood glucose concentration evaluated in 0, 30, 60 and 120 minute after given glucose at 5 g/Kg BW.
The results showed that all dose above, given significant .
<0.
reduction glucose intolerance.
Therefore.
Lactobacillus sporogenes may potensial as a preventive for Glucose However, further studies still required.
Key words: Diabetes Mellitus.
Lactobacillus sporogenes .
Glucose intolerance ABSTRAK Saat ini masalah kesehatan telah mengalami pergeseran dari penyakit infeksi menjadi penyakit degeneratif.
Perkembangan penyakit degeneratif dipicu oleh perubahan gaya hidup, lingkungan dan genetika.
Salah satu penyakit degeneratif yang banyak diderita adalah Diabetes Mellitus.
Penelitian kali ini dilakukan untuk mengevaluasi efektifitas lactobacillus sporogenes terhadap penurunan intoleransi glukosa yang menjadi penanda awal terjadinya Diabetes Mellitus.
Mencit jantan galur swiss webster diberi suspensi lactobacillus sporogenes secara oral selama 7 hari, dengan dosis yang digunakan adalah 12 x 106 / Kg BB, 24 x 106 / Kg BB dan 48 x 106 / Kg BB.
Setelah diberikan suspensi lactobacillus sporogenes kemudian diberikan deksametason secara intraperitoneal selama 4 hari dengan dosis 20mg/ Kg BB, selanjutnya diberikan glukosa dengan dosis 5 gr/ Kg BB.
Aktivitas antidiabetes ini dievaluasi dengan dilakukannya pengamatan kadar glukosa darah puasa pada waktu 0, 30, 60, dan 120 menit pada seluruh kelompok.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa seluruh dosis diatas yang digunakan dari suspensi lactobacillus sporogenes memberikan penurunan intoleransi glukosa dengan ditandai penurunan kadar gula darah secara bermakna .
<0.
Oleh karena itu, lactobacillus sporogenes mungkin bisa diterima sebagai sumber yang potensial sebagai terapi preventif dan bahkan kuratif pada intoleransi glukosa.
Akan tetapi masih perlu dilakukan suatu penelitian lebih lanjut Kata Kunci: Diabetes Mellitus.
Lactobacillus sporogenes .
Intoleransi Glukosa
PENDAHULUAN
Perkembangan zaman yang disertai dengan perubahan gaya hidup dan mengakibatkan terjadinya perubahan pola penyakit dari penyakit infeksi menjadi penyakit degeneratif.
Penyakit degeneratif adalah suatu mengakibatkan penurunan fungsi tubuh atau pada keadaan dimana tubuh tidak dapat memperbaikinya (Bateman et al,2.
Salah satu penyakit degeneratif adalah penyakit Diabetes Mellitus.
Diabetes mellitus adalah suatu penyakit yang termasuk pada gangguan metabolik kronik serta memiliki ciri hiperglikemia yang dihubungkan dengan komplikasi Perkembangan penyakit diabetes yang sangat cepat dan berkorelasi dengan peningkatan morbiditas dan mortalitas telah mendorong untuk penemuan serta Jurnal Kesehatan Bakti Tunas Husada Volume 13 Nomor 1 Februari 2015 penciptaan-penciptaan obat terbaru.
Akan tetapi, penemuan-penemuan obat masih cenderung pada penemuan senyawasenyawa kimia atau penurunan dari struktur induknya.
Kita terkadang lupa bahwa sebenarnya tubuh memiliki mekanisme pencegahan serta pemulihan kembali kondisi tubuh Salah satunya adalah fungsi microbiota tubuh terhadap resistensi insulin dan perkembangan diabetes.
Perubahan mengakibatkan peningkatan permeabilitas intestinal sehingga meningkatkan absorpsi Lipopolisakarida (LPS) yang dapat mengaktivasi Toll Like Receptor 4 dan Toll Like Reseptor 2 dan reseptor LPS CD14 .
elain oleh lipopolisakarida TLR 4 dan 2 dapat juga diaktivasi oleh asam lemak jenu.
yang dapat mengakibatkan aktifasi jalur inflamasi.
Aktifnya jalur tersebut dapat mengakibatkan gangguan sinyal insulin, dengan menurunnya fosforilasi reseptor insulin yang akibatnya dapat mengakibatkan resistensi insulin dan berkembang menjadi diabetes tipe 2 (Andrea et al ,2.
Berdasarkan hal tersebut, maka perlu dilakukan penelitian untuk mengetahui efektifitas lactobacillus sporogeneus sebagai salah satu flora normal .
intoleransi glukosa.
BAHAN DAN METODE
ALAT
Peralatan percobaan ini ialah timbangan mencit, gelas kimia, gelas ukur, batang pengaduk pengamatan, tempat minum, sonde oral, kertas saring, mortir dan stemper, , tabung reaksi, pipet tetes, cawan penguap, blender, hotplate, baskom, timbangan, corong, clinipet, labu ukur, gunting bedah, kaca arloji, botol semprot, cawan penguap, glucometer .
asy touc.
, glucotest strip test .
asy touc.
dan syringe 1ml.
BAHAN
Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain Aquabidest, serbuk gergaji kayu.
NaCl 0,9 %, dexamethasone injection, alkohol.
Pakan Tikus.
Etanol 96% .
Lactobacillus sporogeneus (/ tablet >= 50 juta spor.
Hewan Uji Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit putih galur swiss-webster dengan berat 25-30 gram.
Hewan uji diadaptasikan .
selama 7 hari.
Prosedur Penelitian Dosis Lactobacillus sporogenes Dosis untuk manusia sekali minum adalah A 600 juta spora Lactobacillus Dosis merupakan hasil konversi dari manusia dengan faktor konversi 0.
Dosis yang akan digunakan adalah :
Dosis I : .
x 106 / Kg BB) Dosis II : .
x 106/ Kg BB) Dosis i : .
x 106/ Kg BB) Pengujian Aktivitas Intoleransi Glukosa Hewan uji diadaptasikan .
selama 7 hari.
Selama pengujian tikus diberikan minuman dan makanan standar dan larutan uji dosis I, dosis II dan dosis i selama 7 hari sebelum pengujian.
Pengujian dilakukan pada 5 kelompok mencit jantan galur swiss-webster, pengelompokan tersebut dipilih secara acak dan masing-masing kelompok terdiri dari 6 ekor mencit.
Kelompok I : kelompok normal, diberikan minuman dan makanan standar dan suspensi CMC 0.
Kemudian diberikan glukosa .
5g/ kg b.
setelah dipuasakan terlebih dahulu selama 15 jam Kelompok II : kelompok kontrol negatif, diberikan injeksi dexamethasone .
mg/kg bb /har.
secara intraperitoneal selama 4 hari.
Kemudian diberikan glukosa .
5g/ kg b.
setelah dipuasakan terlebih dahulu selama 15 jam Kelompok i : kelompok uji dosis I, diberikan injeksi dexamethasone .
mg/kb/har.
secara intraperitoneal selama 4 hari.
Kemudian diberikan glukosa .
osis 5g/ kg b.
setelah dipuasakan terlebih dahulu selama 15 jam.
Kelompok IV : kelompok uji dosis II, .
mg/kb/har.
secara intraperitoneal selama 4 hari.
Kemudian diberikan glukosa .
5g/ kg b.
setelah dipuasakan terlebih dahulu selama 15 jam Jurnal Kesehatan Bakti Tunas Husada Volume 13 Nomor 1 Februari 2015 Kelompok V : kelompok uji dosis i, diberikan injeksi dexamethasone .
mg/kb/har.
secara intraperitoneal selama 4 hari.
Kemudian diberikan glukosa .
osis 5g/ kg b.
setelah dipuasakan terlebih dahulu selama 15 jam.
Dilakukan pengamatan kadar glukosa darah puasa dan pengamatan gula darah setelah pemberian glukosa .
5g/kb BB) pada waktu 0, 30, 60, dan 120 menit pada seluruh kelompok .
uiying zhou et all.
Dilanjutkan dengan uji Post Hoc LSD untuk melihat perbedaan nyata antar Hasil Pengujian aktivitas intoleransi glukosa Lactobacillus sporogenes ini didasarkan berkembang pesatnya penelitian mengenai peran mikrobiota pada berbagai macam penyakit salah satunya diduga memiliki khasiat dalam pencegahan intoleransi glukosa.
Berdasarkan hasil pengujian dan Lactobacillus sporogenes memiliki efektifitas dalam meningkatkan sensitifitas dan menurunkan resiko intoleransi glukosa.
Data hasil penelitian adalah sebagai berikut.
Analisis Data Data yang diperoleh selanjutnya menggunakan Uji ANAVA untuk melihat apakah dosis uji yang diberikan mempunyai pengaruh yang berbeda Tabel 1.
Data Pemeriksaan Intoleransi Glukosa Data Pemeriksaan Intoleransi Glukosa Waktu/ Rata-rata Kadar Gula Darah Kelompok Normal 4A4.
4A5.
3A8.
93A2.
Negatif 8A4.
2A10.
8A10.
101A5.
Uji 1 8A4.
2A15.
102A7.
75A4.
Uji 2 4A7.
124A17.
109A10.
73A3.
Uji 3 8A10.
6A18.
8A14.
66A3.
Berdasarkan hasil pengujian diatas, dapat terlihat pada tabel 1 diatas dapat terlihat bahwa pada waktu 2 jam setelah pemberian glukosa tmenunjukkan dosis uji 1, 2 dan 3 kadar gula darahnya lebih rendah dibanding kelompok kontrol dan kelompok negative, sehingga dapat disimpulkan bahwa dosis tersebut memberikan efek penurunan gula darah.
Dikarenakan kadar gula darah kembali normal setelah 2 jam pada homesotasis normal karenanya dilakukan pengujian lanjutan statistika hanya pada waktu 120 menit.
Tabel 2.
Hasil Uji Normalitas One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test KadarGula Normal Parameters.
Most Extreme Differences Mean Std.
Deviation Absolute Positive Negative Kolmogorov-Smirnov Z Asymp.
Sig.
-taile.
Jurnal Kesehatan Bakti Tunas Husada Volume 13 Nomor 1 Februari 2015 Berdasarkan pada table 2 diatas didapatkan hasil pengujian normalitas bahwa data .
>0.
Tabel 3.
Pengujian Homogenitas Levene Statistic Berdasarkan Sig.
memiliki varian yang homogen .
> Tabel 4.
Hasil Pengujian ANAVA Between Groups Within Groups Total Sum of Squares Dikarenakan data yang digunakan memiliki nilai distribusi normal dan homogen, maka bisa dilanjutkan dengan pengujian ANOVA.
Hasil pengujian ANAVA bisa dilihat diatas pada tabel 4.
Berdasarkan pada pengujian ANOVA perbedaan yang bermakna antar perlakuan pada taraf nyata 0.
05 sehingga Ho ditolak.
Hal ini mengindikasikan Lactobacillus Mean Square sporogenes dari ketiga dosis uji memberikan perbedaan yang bermakna terhadap turunnya kadar gula darah dengan tingkat kepercayaan 95%.
Penurunan kadar gula darah untuk masing-masing dibandingkan dan dianalisis dengan menggunakan uji LSD (Least Significant Difference.
Tabel 5.
Hasil Uji LSD
Multiple Comparisons Dependent Variable: KadarGula
LSD
(I) Kelompok (J) Kelompok Mean Diff erence (I-J) Std.
Error The mean diff erence is signif icant at the .
05 lev el.
Perbedaan Rataan Signifikan Pada Level 0.
Sig.
Sig.
95% Confidence Interv al Lower Bound Upper Bound Jurnal Kesehatan Bakti Tunas Husada Volume 13 Nomor 1 Februari 2015 Keterangan:
Negatif : larutan CMC 0.
Normal : Tidak diberikan perlakuan apapun Uji I : suspensi Lactobacillus sporogenes.
x 106 / Kg BB)disuspensikan dalam CMC 0.
Uji II : suspensi Lactobacillus sporogenes.
x 106 / Kg BB)disuspensikan dalam CMC 0.
Uji i : suspensi Lactobacillus sporogenes.
x 106 / Kg BB)disuspensikan dalam CMC 0.
Pada tabel 5.
diatas dapat terlihat masing-masing Lactobacillus sporogenes menunjukkan adanya perbedaan yang bermakna terhadap kelompok normal dan kontrol negatif pada penurunan gula darah pada taraf nyata 0.
Dari tabel hasil LSD tersebut dapat terlihat juga adanya perbedaan bermakna antara kelompok normal dan kelompok negatif, artinya pada kelompok negatif mengalami intoleransi glukosa dengan ditandai kenaikan dibanding kelompok normal yang diakibatkan induksi dexamethasone, meskipun tidak pada nilai ambang intoleransi glukosa yang ditetapkan American Diabetes Association .
-199 mg/d.
Sedangkan dosis uji I dan uji II tidak berbeda secara bermakna, sedangkan uji i memiliki perbedaan secara bermakna dengan seluruh kelompok.
Jadi uji i memiliki khasiat yang lebih baik dibanding dengan dosis uji I dan uji II.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Berdasarkan pada hasil ANAVA pada table 4 diatas, bahwa ketiga dosis uji memiliki perbedaan yang bermakna, kemudian untuk mengetahui perbedaan masing-masing dilanjutkan dengan analisis LSD.
Hasil dari analisis LSD menunjukkan bahwa seluruh kelompok uji dan kelompok negatif memberikan perbedaan yang bermakna dibanding kelompok normal, artinya dosis uji 1, 2 dan 3 memiliki perbedaan yang signifikan dalam penurunan kadar gula darah dibandingkan dengan kelompok normal.
Perbedaan kelompok kontrol negatif dan kelompok normal dalam kadar gula darah dimana dibandingkan kelompok kelompok normal kemungkinan dikarenakan efek perlakuan pada pemberian deksametason kepada kelompok kontrol negatif meskipun tidak sampai pada nilai IGT sesuai rekomendasi American Diabetes Association .
-199 mg/d.
Pemberian deksametason ini dapat mengakibatkan intoleransi glukosa dengan cara merubah metabolisme lemak.
Perubahan mengakibatkan induksi asam lemak bebas yang menyebabkan meningkatnya kadar lemak sehingga mengakibatkan aktivasi jalur inflamasi melalui TLR-4 (Toll like receptor-.
Aktivasi
TLR-4
mengakibatkan sekresi sitokin seperti cJun NH2-terminal kinase (JNK) and IB kinase complex (IKK)/inhibitor of nuclear factor-B (IB)/nuclear factorB (NF-B).
IL-6 yang dapat menurunkan fosforilasi reseptor insulin yang akibatnya dapat mengakibatkan resistensi insulin dan berkembang menjadi diabetes tipe 2.
Sedangkan pada hasil seluruh kelompok uji, hasilnya memiliki perbedaan yang bermakna dibandingkan dengan kelompok normal dan kelompok negatif, hal ini sesuai dengan hipotesa penulis bahwa mikrobiota dalam hal ini adalah Lactobacillus efektifitas dalam menurunkan resiko intoleransi glukosa.
Perbedaan hasil yang bermakna antara kelompok uji dan kelompok normal memberikan indikasi bahwa dengan pemberian Lactobacillus sporogenes usus.
lora normal usu.
kemungkinan dapat memberikan efektifitas yang baik dalam memeilihara sensitifitas insulin dan kadar insulin dengan cara menghambat aktivasi jalur inflamasi baik dari adanya pathogen, lipopolisakarida atau asam lemak bebas.
Selain itu dengan terpeliharanya mikrobiota usus juga dapat menginduksi pertumbuhan L-sel pada proksimal usus yang meningkatkan respon GLP-1 terhadap adanya makanan.
Sedangkan pada hasil perbedaan yang bermakna dengan seluruh kelompok uji dengan kelompok negatif kemungkinan diakibatkan karena dihambatnya efek metabolism lemak karena induksi Lactobacillus sporogenes melalui supresi Fasting Induce Adypocite Factor yang mengakibatkan tetap disimpannya kadar lemak didalam Jurnal Kesehatan Bakti Tunas Husada Volume 13 Nomor 1 Februari 2015 adipose dan tidak disekresikan ke dalam darah yang mengakibatkan oksidasi pada lemak tersebut yang kemudian dapat mengaktivasi jalur inflamasi dan akhirnya mengakibatkan resistensi insulin.
Selain itu, efek glukoneogenesis yang disebabkan induksi deksametason juga diturunkan efeknya melalui induksi L-sel yang mengakibatkan sekresi GLP-1.
Setelah membahas perbandingan antara kelompok normal dan kelompok negatif serta kelompok uji dengan kelompok negatif dan kelompok normal sekarang kita melanjutkan pada perbandingan antara setiap kelompok uji.
Berdasarkan pada hasil analisis LSD dihasilkan bahwa kelompok uji 3 memberikan hasil penurunan intoleransi glukosa yang bermakna terhadap setiap kelompok uji.
yang ditandai penurunan kadar gula darah .
Sedangkan kelompok kelompok uji 2 memberikan hasil yang tidak bermakna dibanding dengan kelompok uji 1.
Sehingga dapat disimpulkan bahwa dosis uji i intoleransi glukosa yang paling tinggi serta penurunan glukosa darah bergantung pada peningkatan dosis KESIMPULAN Hasil studi pra klinis terhadap mencit setelah pemberian tiga macam dosis, .
x 106 / Kg BB) untuk dosis uji I, .
x 106/ Kg BB) untuk dosis uji II, .
x 106/ Kg BB) untuk dosis uji i dengan pemerian selama 7 hari , ketiga dosis uji ini intoleransi glukosa yang ditandai dengan penurunan kadar gula darah yang berbeda secara bermakna dibanding kelompok normal dan negatif.
Penggunaan dosis uji i .
x 106/ Kg BB) memberikan hasil tertinggi dalam penurunan intoleransi glukosa dengan ditandai penurunan gula darah tertinggi.
SARAN
Diperlukan penelitian lebih lanjut menggunakan metode uji yang berbeda dan mengetahui secara pasti mekanisme yang terjadi dalam efektifitas penurunan intoleransi glukosa oleh Lactobacillus
DAFTAR PUSTAKA