JURNAL MIPA 9 . 106 - 112 dapat diakses melalui http://ejournal. id/index. php/jmuo Efek Pemberian Ekstrak Etanol Buah Pare (Momordica Charantia L. ) Terhadap Gambaran Histopatologi Organ Hepar Pada Tikus Putih Jantan Galur Wistar (Rattus Novergicus L. Varian Giovanni Padang a * ,Edwin de Queljoe a ,Karlah Lifie Riani Mansauda a a Program Studi Farmasi. Fakultas MIPA. Universitas Sam Ratulangi. Manado KATA KUNCI Buah Pare Gambaran Histopatologi Tikus putih Jantan Galur Wistar Ekstrak Organ Hepar ABSTRAK KEYWORDS Bitter Melon Histopathological Picture Male White Rats of The Wistar Strain Fatty Necrosis Venacentral Congestion Regenerative Cells. ABSTRACT Bitter Melon (Momordica Charantia L) is a fruit that has a various of therapeutic properties. However. Consuming an excess amount af bitter melon may have an unknown side effects towards the humanAos liver. The Purpose of this research is to determine the effect of histopathlogical picture of the liver in the male white rats of wistar strain. The sample was extracted by using the maceration method. The acquired extract was given to the four guinea pig with 0, 100, 200, and 400 mg/ml concentration consecutively. After 50 days, the guinea pigAos liver organ was taken to be tested, and histopathological preparations was made. Histopathological picture shows fats that was accumulated in the liver tissue of the liver that were given 100 mg/ml of P. For Treatment P. dose of 200 mg/ml was seen to be accompanied by fatty necrosis, also seen the appeareance of regenerative At P. dose of 400 mg/ml the appearance of fat, necrosis, venacentral Congestion, also seen signs of regenerative cells. This shows that the use of bitter melon extract may cause a side/negative effect to the sampelAos hepatic tissue Augalur wistarAy Buah Pare (Momordica charantia L. ) merupakan buah yang memiliki berbagai khasiat terapetik tapi belum diketahui efek samping apabila dikonsumsi secara berlebihan terhadap gangguan organ hepar. Tujuan penelitian ini untuk Mengetahui Pengaruh Efek Ekstrak Etanol Buah Pare pada Gambaran Histopatologi Organ hepar Tikus putih jantan galur wistar. Sampel diekstraksi menggunakan metode maserasi. Ekstrak yang diperoleh diberikan kepada 4 kelompok hewan uji dengan konsentrasi 0,100,200, dan 400mg/ml secara berturut-turut. Setelah 50 hari, organ hepar hewan uji diambil dan dibuat preparat histopatologi. Gambaran Histopatologi menunjukan sampel organ hepar perlakuan P. dosis 100 mg/mL terlihat fokus perlemakan, untuk perlakuan P. dosis 200 mg/mL terlihat perlemakan disertai dengan terjadinya nekrosis, juga terlihat munculnya sel Pada P. dosis 400 mg/mL munculnya perlemakan, nekrosis, kongesti venacentralis, juga terlihat tanda sel regeneratif. Hal ini menunjukkan bahwa penggunaan ekstrak buah pare dapat menyebabkan efek negative pada jaringan sampel organ hepar galur wistar. TERSEDIA ONLINE 01 Agustus 2020 Pendahuluan Hepar . merupakan organ terbesar dalam tubuh manusia. Pada organ hepar terjadi proses- proses penting bagi kehidupan manusia,yaitu proses penyimpanan energi, pembentukan protein dan asam empedu, pengaturan metabolisme kolesterol, dan penetralan racun/obat yang masuk dalam tubuh *Corresponding author: Email address: Varianpadang7@gmail. Published by FMIPA UNSRAT . JURNAL MIPA 9 . 106 - 112 Dapat kita bayangkan akibat yang akan timbul apabila terjadi kerusakan pada hepar (A Price, 2. Disfungsi hepar disebabkan akibat kerusakan pada sel-sel parenkim hepar yang bisa secara langsung disebabkan oleh penyakit primer atau secara tidak langsung disebabkan oleh obstruksi Proses berkembang menjadi disfungsi hepatoseluler dapat disebabkan oleh penyebab menular . nfectious agen. , seperti bakteria serta virus, dan oleh keadaan anoksida, kelainan metabolik, toksin serta obatobatan, hipersensitifitas (J. Corwin dan Elisabeth, 2. Buah Pare (Momordica chartia L. ) adalah buah yang sering kita temukan di Indonesia memiliki keunikan, yaitu bentuknya yang berbintil dan rasanya sangat pahit, namun dibalik rasa pahitnya itu ternyata buah pare sangat kaya akan khasiat. Buah pare memiliki zat bermanfaat, diantaranya karantin, hidroksitriptamin, glikosida kukurbitasin. PolipeptideP insulin . olipeptida yang mirip dengan insuli. yang memiliki komponen yang menyerupai sulfonilurea (Obat Diabetes paling tu. , vitamin A. B dan C. Buah pare memiliki rasa pahit yang disebabkan oleh glikosida kukurbitasin, maka sebagian masyarakat kurang berminat untuk mengkonsumsi buah pare (Widayanti, 2. Dalam pengobatan tradisional, tanaman pare (Momordica charantia L) memberikan andil yang cukup besar bagi masyarakat. Selain kandungan gizinya yang tinggi, tanaman pare juga mengandung khasiat sebagai obat, sehingga sering dimanfaatkan sebagai bahan ramuan jamu. Di India, seluruh bagian tanaman pare dipakai sebagai obat, mulai dari akar, daun, buah, dan bijinya. Akarnya dipakai untuk mengobati penyakit mata, daunnya untuk memperlancar buang air besar, kulit terbakar, obat cacing, memperbanyak air susu ibu, menambah nafsu makan dan sebagai obat luar untuk menyuburkan rambut. Buahnya dipakai untuk pencuci darah, anti diabetes, asma, dan rematik. Indonesia, secara turun-temurun, tanaman pare banyak dimanfaatkan untuk mengobati beberapa penyakit, seperti diabetes, luka, dan penyakit infeksi Tanaman pare juga dimanfaatkan sebagai anti virus, untuk mengobati penyakit hepatitis, demam, dan campak. Pengaruh ekstrak buah tanaman pare sebagai anti kanker, telah diteliti di Universitas Meiji. Jepang. Berdasarkan hasil penelitian tersebut, ekstrak buah tanaman pare sebanyak 0,5% yang dimasukkan kedalam minuman tikus mampu menghambat perkembangan tumor pada kelenjar susu . (Tati, 2. Hepar . merupakan organ terbesar dalam tubuh manusia. Pada organ hepar terjadi prosesproses penting bagi kehidupan manusia,yaitu proses penyimpanan energi, pembentukan protein dan asam empedu, pengaturan metabolisme kolesterol, dan penetralan racun/obat yang masuk dalam tubuh Dapat kita bayangkan akibat yang akan timbul apabila terjadi kerusakan pada hepar (A Price, 2. Disfungsi hepar disebabkan akibat kerusakan pada sel-sel parenkim hepar yang bisa secara langsung disebabkan oleh penyakit primer atau secara tidak langsung disebabkan oleh obstruksi Proses berkembang menjadi disfungsi hepatoseluler dapat disebabkan oleh penyebab menular . nfectious agen. , seperti bakteria serta virus, dan oleh keadaan anoksida, kelainan metabolik, toksin serta obatobatan, hipersensitifitas (J. Corwin dan Elisabeth, 2. Berdasarkan informasi yang diatas maka penulis terdorong untuk melakukan penelitian tentang, apakah penggunaan buah pare secara berlebihan memiliki efek samping terhadap gangguan organ hepar atau tidak melalui gambaran histopatologi, dalam rencana penelitian ini, peneliti melakukan pengujian ekstrak etanol buah pare terhadap tikus putih jantan galur wistarMaterial dan Metode. Material dan Metode Alat Alat yang digunakan, yaitu : Timbangan analitik, sudip, cawan petri, waterbath, oven, labu ukur, gelas ukur, gelas beker, corong gelas, pipet, batang pengaduk, hot plate, kertas saring, sarung tangan lateks, masker, botol minum, gunting blender, sonde lambung, pinset anatomi, pisau anatomi, papan bedah paraffin, jarum suntik disposible 1 cc, mikroskop, objek gelas, kaca penutup, kandang tikus putih jantan wistar, lemari pendingin, disonifikasi dan mikrotom. Bahan Bahan yang digunakan, yaitu : Tikus putih jantan galur wistar (Rattus novergicus L. ) 16 ekor, buah pare, etanol 96%, formalin 10 %, aquades. Erlen Meyer. Carboxymethil Cellulose atau (CMC 1 %), pakan tikus putih jantan galur wistar yaitu pellet AD2, alluminium foil, kloroform,Xylol dan Hematoksin Pengambilan sampel buah pare Tahap awal dilakukan dengan pengumpulan bahan baku Sampel Buah Pare (Momordica ) yang diambil di daerah kota Tomohon Ekstraksi Buah Pare Buah pare yang akan di gunakan dicuci di air mengalir terlebih dahulu sebelum diekstrak. Buah Pare ditimbang berat basah lalu dipotong kecil, kemudian dikeringkan lewat oven suhu 40EE. Setelah kering, berat kering ditimbang, lalu di blender sampai menjadi simplisia kering, kemudian di timbang berat simplisia. setelah itu lakukan metode maserasi dengan pelarut etanol 96% dan di biarkan selama 5 hari kemudian disaring menggunakan kertas saring dan di lakukan remaserasi dan dibiarkan selama 2 hari. Filtrat yang di peroleh dievaporasi pada suhu 40EE sampai di peroleh ekstrak kental Pembuatan larutan CMC 1% (Carboxymethil Cellulos. JURNAL MIPA 9 . 106 - 112 Sebanyak 1 g serbuk CMC dimasukkan ke dalam gelas beaker yang berisi aquades 50 mL, larutan tersebut dipanaskan di waterbath sambil di aduk hingga homogen. larutan CMC lalu dipindahkan ke labu ukur 100 mL, kemudian ditambahkan aquades hingga tanda tera. Pembuatan Suspensi Ekstrak Buah Pare sebagai Stok Disiapkan berbagai alat dan bahan yang akan Ekstrak buah pare ditimbang dengan menggunakan tiga konsentrasi yaitu konsentrasi 0,18 g, 0,36 g, dan 0,72 g. untuk pembuatan 100 mL, kemudian dimasukan kedalam 3 labu ukur berukuran 100 mL. masing-masing labu ukur yang sudah berisi ekstrak ditambahkan larutan CMC 1% hingga menjadi tiap labu ukur berisi 100mL Kemudian, masing-masing mulut labu ukur ditutup dengan alumunium foil dan disonifikasi selama 30 menit . ingga homoge. Suspensi ekstrak buah pare yang telah dihomogenkan dipindahkan kedalam botol berwarna gelap, ditutup dan disimpan di dalam lemari es. Larutan ekstrak suspensi 100 mL yang sudah jadi digunakan untuk 50 hari perlakuan Penyiapan Hewan Uji Penelitian ini menggunakan Tikus jantan galur wistar (Rattus novergicus L. ) sebagai hewan uji yang berusia sekitar 2-3 bulan dengan bobot rata-rata 200 tikus yang akan digunakan dalam penelitian harus diaklimatisasi terlebih dahulu selama kurang lebih 1 minggu sebelum perlakuan. Sampel diadaptasikan dengan tempat tinggal barunya, dengan pemberian makanan dan minuman. Perlakuan ini disamakan untuk semua tikus. Adaptasi cukup dilakukan selama 7 hari. Adaptasi ini bartujuan untuk semua objek penelitian supaya hewan coba dalam kondisi tidak stress dan dalam keadaan yang sama saat dimulai penelitian Pengelompokan Hewan Uji Penelitian ini menggunakan tikus putih jantan galur wistar (Rattus novergicus L. ) sebagai hewan uji menjadi 4 kelompok dimana setiap kelompok terdiri dari 3 ekor tikus putih jantan galur wistar (Rattus novergicus L. ) yang dipelihara dalam kandang berbahan plastic dan ditutup dengan kawat kasa dan diberi pakan berupa pellet. Kelompok 1 sebagai kontrol negatif . anpa Kelompok 2 sebagai kelompok yang akan diberikan perlakuan ekstrak buah pare dengan dosis 100 mg/ml. Kelompok 3 sebagai kelompok yang diberikan perlakuan ekstrak buah pare dengan dosis 200 mg/ml Kelompok 4 sebagai kelompok yang diberikan perlakuan ekstrak buah pare dengan dosis 400 mg/ml Dosis Perlakuan Pemberian ekstrak dilakukan selama 50 hari. Perlakuan yang digunakan adalah kontrol . idak diberi ekstra. dan yang diberi ekstrak buah pare (Momordica Charantia. L) dengan 3 dosis yang berbeda Ae beda yaitu 100 mg 200 mg, dan 400 mg. Berikut ini tabel konversi dosis hewan percobaan (Laurence and Bacharach, 1964. Sari, 2. Perlakuan Hewan Uji Ekstrak buah pare diberikan secara oral dengan menggunakan sonde dengan dispo 1 mL yang dimasukan kedalam mulut secara perlahan-lahan untuk menghindari terjadinya refluks muntah. Hewan uji sebelum diberi perlakuan dipuasakan atau tidak diberi makan dan minum terlebih dahulu selama kurang lebih 6 jam. Hewan uji yang terdiri dari 4 kelompok diberikan perlakuan yang berbeda-beda. Kelompok 2, 3 dan 4 diberikan perlakuan sesuai dosis masing-masing kelompok yaitu 0,0018 g/tikus/hari sebanyak 1 mL, 0,0036 g/tikus/hari sebanyak 1 mL, dan 0,0072 g/tikus/hari sebanyak 1 setiap hari sebanyak 1 mL, sedangkan kelompok 1 hanya diberikan pakan biasa berupa pellet atau pakan tikus Pengambilan Jaringan Tikus Putih Jantan Langkah pertama tikus dianastesi menggunakan kloroformdengan cara memasukkan tikus wistar ke dalam wadah tertutup kemudian diamati sampai pada tingkatpembiusan yang cukup dalam. Setelah tikus tidak sadar kemudian tikus dikeluarkan dari pembedahan dengan cara fiksasi setiap anggota gerak tikus dengan jarum pentol. Tikus dibedah kemudian diambil organ hepar dan di simpan pada wadah botol kecil yang berisi formalin 10%. Pemeriksaan Laboratorium Histopatologi Pemrosesan jaringan Sampel jaringan diproses di lab histopatologi. Jaringan hepar direndam dalam alkohol masingmasing sebanyak 3 kali selama 1 jam untuk proses Pada proses clearing, direndam xylol sebanyak 3 kali masing-masing selama 1 jam. Infiltrasi dalam paraffin cair dengan suhu A 60EE kemudian dibiarkan selama 24 jam. Pembuatan cetakan dengan cara jaringan ditempatkan dalam cetakan berukuran 1,5 cm x 1,5 cm kemudian paraffin dituangkan dalam cetakan lalu dikeringakan sehingga terbentuk blok. Jaringan dipotong menggunakan mikrotom dengan ketebalan 5-6 Potongan-potongan diletakkan dalam air bersuhu A 45EE sehingga potongan-potongan jaringan tersebut mengembang. Jaringan yang telah berada pada gelas objek dikeringkan dengan menggunakan tissue/kertas saring dengan cara menekan pada bagian atasnya. Pewarnaan jaringan Deparafinisasi, celupkan dalam xylol selama 10 Rehidrasi, celupkan pada alcohol 95% selama 3 menit, alcohol 70% selama 3 menit dan air selama 3 menit,kemudian ditiriskan. Pewarnaan jaringan dilakukan beberapa tahap yaitu pertama, celupkan pada Hematoksin Eosin Gill selama 3 menit. Kedua. Cuci dengan air mengalir selama 3 menit. Ketiga, celupkan dalam eosin selama 1 menit dan Keempat, cuci dalam alkohol 95% selama 3 menit dan keringkan. Kelima. Celupkan dalam xylol selama 5 menit. JURNAL MIPA 9 . 106 - 112 Tetesi sediaan dengan menggunakan perekat entelan, lalu ditutup dengan deck glass dari arah satu sisi agar tidak ada gelembung udara. Sediaan kemudian diperiksa di bawah mikroskop. Pembacaan hasil Sediaan dievaluasi menggunakan mikroskop cahaya untuk melihat gambaran histopatologi dari organ hepar tikus. Dilakukan pemotretan pada bagian yang perlu untuk kepentingan dokumentasi. Analisis data Data yang dikumpulkan dalam penelitian ini adalah data primer hasilpengamatan gambaran histopatologi hepar tikus Wistar dari kelompok perlakuan yangdibandingkan dengan kelompok Hasil dan Pembahasan Bagian tanaman yang digunakan hanya bagian dalam buah pare(Momordica charantia L) yang diambil di kota Tomohon. Sulawesi utara Proses ekstraksi simplisia buah pare diekstraksi dengan metode maserasi. Simplisia yang digunakan sebesar 200 g dan dimasukkan kedalam tabung Erlenmeyer,Filtrat yang di peroleh di evaporasi dengan suhu 40AC lalu menghasilkan ekstrak kental sebanyak 49,2 g. Pemilihan metode maserasi dikarenakan maserasi adalah metode pemisahan senyawa dengan cara perendaman menggunakan pelarut etanol pada temperature ruangan. Proses maserasi sangat menguntungkan dalam isolasi senyawa bahan alam karena selain murah dan mudah dilakukan, dengan perendaman sampel tumbuhan akan terjadi pemecahan dinding dan membran sel akibat perbedaan tekanan antara di dalam dan di luar sel, sehingga metabolit sekunder yang ada di dalam sitoplasma akan terlarut dalam pelarut (Pamolango, 2. Hewan Uji yang digunakan sebanyak 12 ekor tikus putih jantan, tikus putih jantan digunakan karena tikus jantan tidak mengalami siklus menstruasi sehingga tidak dapat mempengaruhi proses dari penelitian dalam pemberian perlakuan, sebelum diberikan perlakuan tikus putih jantan harus diaklimatisasi terlebih dahulu,proses aklimatisasi dilakukan kurang lebih selama 2 minggu. aklimatisasi adalah upaya proses penyesuaian fisiologis atau adaptasi dari suatu organisme terhadap suatu lingkungan baru yang akan dimasukinya (Smith dan Mangkoewidjojo, 1. Tikus Putih Jantan yang sudah diberikan perlakuan sesuai hari yang sudah ditentukan diambil sampel organ hepar tiap tikus tersebut, organ hepar diteliti karena organ hepar salah satu organ paling penting dalam tubuh untuk fungsi metabolisme dan detoksifikasi racun. Sebelum tikus dilakukan insisi peritoneum tikus lebih dahulu dianastesi dengan menggunakan kloroform, kloroform digunakan karena memiliki kemampuan bius yang cepat dan jika dibiarkan lama maka tikus tersebut akan langsung mati dan siap untuk dilakukan Kemudian organ disimpan di larutan formalin sebelum dibawa ke laboratorium Histopatologi dimana akan dilakukan proses Formalin penyimpanan organ hepar supaya organ yang diambil tidak terjadi proses pembusukan dan jaringan dari organ hepar tersebut tidak mati sebeluAo. m dilakukan proses pemeriksaan laboratorium. Tabel. 1 Hasil Mikroskopis Laboratorium Sampel Organ Hepar MIKROSKOPIS KELOMPOK 1 Terlihat normal dan tidak ada Kontrol kerusakan jaringan (K1. K2. 2 Fokus-fokus perlemakan . ,2,. ,2,. 3 Perlemakan,nekrosis,Selregenera P tif, . ,2,. ,2,. 4 Perlemakan, kongesti,vena P centralis,fokus-fokus nekrosis,Sel . ,2,. regeneratif, . ,2,. Hasil dari laboratorium Patologi dapat dilihat digambar yang disertakan di lampiran. Dari 4 kelompok yang sudah diteliti yaitu kelompok Kontrol. Perlakuan P. Perlakuan P. dan perlakuan P. Dapat ditemukan kelompok kontrol yang hanya diberi makan dan minum gambaran histopatologinya terlihat normal dan tidak terlihat tanda tanda terjadi gangguan atau kerusakan. Gambaran dari kelompok kontrol dapat dilihat di gambar dengan pembesaran 40x di mikroskop dan Dari hasil laboratorium yang terlihat vena centralis organ hepar terlihat normal dan tidak terjadi gangguan yang signifikan. kelompok perlakuan P. terlihat terjadi timbulnya tanda tanda perlemakan pada organ hepar, tanda tersebut dapat terlihat dari munculnya titik titik pelebaran dalam struktur jaringan dari sampel organ hepar tersebut. Perlemakan adalah adanya lemak dalam sel-sel hepar . Hal ini disebabkan kegagalan metabolisme lemak di hepar yang normal, baik karena suatu kerusakan didalam sel hepar atau pengiriman lemak, asam lemak, maupun karbohidrat terhadap kapasitas sekresi lemak sel hepar. Pada perlemakan hepar yang berat, lemak hepar dapat 50-60% keseluruhan(Sherlock,2. Gambar perlemakan tersebut dapat terlihat dengan alat mikroskop. Di kelompok perlakuan P. juga terlihat timbulnya tanda tanda terjadinya perlemakan pada organ hepar seperti yang terlihat pada sampel hepar dengan dosis perlakuan P. , di perlakuan P. terlihat timbulnya tanda tanda terjadinya nekrosis, tanda tanda nekrosis dapat terlihat di hasil lab mikroskopis dimana ketika sel tersebut sudah nekrosis maka jaringan di dalam sel tersebut akan terlihat lebih buram dari jaringan normal, hal ini di karenakan nekrosis merupakan salah satu pola dasar kematian sel. Nekrosis terjadi setelah suplai darah hilang atau setelah terpapar toksin dan ditandai dengan pembengkakan sel, denaturasi protein, dan kerusakan organel. Hal ini dapat menyebabkan disfungsi berat jaringan organ hepar JURNAL MIPA 9 . 106 - 112 (Kumar, et al 2. Di perlakuan P. juga mulai terlihat tanda tanda terjadinya sel regeneratif. Pada perlakuan . tanda tanda yang terlihat adalah timbulnya juga fokus fokus perlemakan pada sampel hepar tersebut,hal itu dikarenakan semakin besar dosis yang di berikan dalam jangka waktu yang lama maka semakin tinggi resiko terjadinya Pada perlakuan P. juga terlihat timbulnya nekrosis atau pola dasar kematian sel seperti yang terlihat di perlakuan P. perlakuan P. juga terlihat tanda tanda sel regeneratif, dimana sel yang terlihat melakukan proses regenerasi, . egenerasi sel adalah proses pembentukan sel untuk menggantikan sel yang mati yang diatur mulai tingkat terkecil dalam sel tubuh kita(Sherwood, 2. Sel regeneratif dapat terlihat di gambar hasil lab mikroskopis berupa bintik bintik hitam yang timbul di jaringan hepar tersebut yang bisa di lihat di lampiran. Di perlakuan P. juga terlihat kongesti pada bagian vena centralis, kongesti adalah . embendungan dara. atau berlimpahnya darah di dalam pembuluh darah di wilayah atau region tertentu (Sloune, 2. Gambar 1A. Gambaran mikroskopik . ontrol negati. tampak hati normal dengan vena centralis pembesaran 40x Gambar 2A. Gambaran mikroskopik P. tampak gambaran hati tidak normal dan terlihat terjadi perlemakan pembesaran 100x Gambar 2B. Gambaran mikroskopik P. gambaran hati tidak normal terlihat terjadi perlemakan pembesaran 20 x Gambar 3A. gambaran mikroskopik P. terlihat timbulnya perlemakan nekrosis terlihat sel regeneratif pembesaran 400x Gambar 1B. Gambaran mikroskopik . ontrol negati. tampak hati normal dengan vena centralis pembesaran 100x JURNAL MIPA 9 . 106 - 112 Gambar 3B. terlihat perlemakan, nekrosis dan tanda terjadi sel regeneratif pembesaran 100x Gambar 4A. Hati tidak normal timbul fokusfokus perlemakan, sel regeneratif dan terjadi nekrosis, pembesaran 100x Gambar 4B. gambaran hati tidak normal terlihat kongesti vena centralis pembesaran 40x Gambar 4C. gambaran mikroskopik P. , nekrosis . dan sel regenatif . pembesaran 400x Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan Penggunaan Buah Pare secara berlebihan dapat Mempengaruhi Jaringan dari organ hepar. Pada perlakuan P. Tanda tanda kerusakan yang terlihat adalah timbulnya Pada perlakuan P. tanda tanda kerusakan yang terlihat adalah Terjadinya perlemakan dan nekrosis juga munculnya tanda sel Pada perlakuan P. yang terlihat adalah Timbulnya perlemakan dan terlihat juga kongesti pada vena centralis, terjadi juga nekrosis pada bagian bagian dari jaringan hepar sehingga terjadi proses regenerasi sel. Daftar Pustaka