PEMBERIAN VITAMIN D MENYEBABKAN JUMLAH SEL FIBROBLAS
LEBIH BESAR DIBANDING KONTROL PADA TIKUS WISTAR (RATTUS
NORVEGICUS) YANG DIINDUKSI PERIODONTITIS
Hervina1.
Dwis Syahriel2.
I Gede Pradnya Pramudya3* Department of Periodontia.
Faculty of Dentistry.
Universitas Mahasaraswati Denpasar *Coressponding email : I Gede Pradnya Pramudya.
Email : aguspradnya666@gmail.
ABSTRAK
Periodontitis merupakan suatu penyakit inflamasi destruktif pada jaringan periodontal yang disebabkan oleh mikroorganisme spesifik seperti Porphiromonas gingivalis.
Vitamin D memiliki sifat tumor suppresor, antiinflamasi, dan antibakteri.
Vitamin D mempengaruhi patogenesis penyakit periodontal melalui imunomodulasi, meningkatkan kepadatan mineral tulang, mengurangi resorpsi tulang, dan penting dalam memerangi agen yang menyebabkan penyakit periodontal.
Penelitian sebelumnya menggunakan vitamin D dengan dosis 500-2000IU aman dan efektif dalam pengobatan peradangan Tujuan penelitian untuk mengetahui efektivitas vitamin D terhadap fibroblas pada periodontitis.
Penelitian ini merupakan jenis penelitian eksperimental in vivo dengan menggunakan tikus wistar (Rattus norvegicu.
yang dibagi kedalam tiga kelompok yaitu kelompok kontrol I (K.
tikus sehat diberi vitamin D 2000 IU diobservasi hari ke 7 (K.
, hari ke 14 (K.
dan hari ke 28 (K.
kelompok kontrol II (K.
tikus wistar yang diinduksi periodontitis tanpa pemberian suplemen tambahan yang diobservasi pada hari 7 (K.
, hari ke 14 (K.
dan hari ke 28 (K.
kelompok perlakuan (P.
tikus wistar diinduksi periodontitis kemudian pemberian vitamin D 2000 IU diobservasi pada hari 7 (P.
, hari ke 14 (P.
dan hari ke 28 (P.
Tikus di dekaputasi pada hari ke-28 setelah Spesimen dibuatkan preparat dan pengecatan hematoksilin eosin dilakukan untuk menghitung fibroblas.
Hasil uji one way annova menunjukan nilai p= 0,000 yang berarti bahwa terdapat perbedaan rerata jumlah fibroblast pada ke sembilan kelompok .
< 0,.
Hasil dari uji LSD menunjukan bahwa vitamin D dengan dosis 2000IU efektif dalam terapi periodontitis.
Kata Kunci : Vitamin D.
Fibroblas.
Periodontitis ABSTRACT Periodontitis is a destructive inflammation disease on periodontal tissue which caused by specific microorganism such as Porphiromonas gingivalis.
Vitamin D has tumor suppressor, anti-inflammatory, and antibacterial traits.
Vitamin D affects the pathogenesis of periodontal disease via immunomodulation, increases bone mineral density, decreases bone resorption, and important in fighting against agents that cause periodontal diseases.
The previous research used vitamin D with dosage of 500-2000 IU was found safe and effective in treating gingival inflammation.
This research aims to find out the effectiveness of vitamin D towards fibroblast on periodontitis.
This research is an in vivo experimental research by using wistar rats (Rattus norvegicu.
which was divided into three groups, consist of control group 1 (K.
healthy rat was given vitamin D 2000 IU was observed on 7th day (K.
, 14th day (K.
, and 28th day (K.
, control group II (K.
wistar rats was induced periodontitis without additional supplement which was observed on 7th day (K.
, 14th day (K.
, and 28th day (K.
, treatment group (P.
wistar rats was induced periodontitis and given vitamin D 2000 IU was observed on 7th day (P.
, 14th day (P.
, and 28th day (K.
The rat was put down on 28th day after the treatment.
An object glass was made for the specimen and hematoxylin eosin staining was conducted to calculate the fibroblast.
The result from one way annova test showed p value= 0,000 which means that there is a difference on the average number of fibroblast in the nine groups.
The result from LSD test showed that vitamin D with dosage of 2000IU is effective for periodontitis treatment.
Keywords: Vitamin D.
Fibroblast.
Periodontitis PENDAHULUAN Periodontitis merupakan suatu penyakit inflamasi destruktif pada jaringan periodontal yang disebabkan oleh mikroorganisme spesifik, yang menyebabkan kerusakan progresif pada ligamen periodontal dan tulang alveolar dengan manifestasi klinis terbentuknya poket, kegoyangan gigi, hilangnya perlekatan dan resesi gingiva.
Periodontitis merupakan penyakit jaringan periodontal yang disebabkan oleh bakteri patogen yang terdapat dalam plak gigi.
Eliminasi bakteri plak dapat dilakukan secara mekanis, ataupun dikombinasikan dengan bahan kemoterapeutik yang pemberiannya dapat secara lokal maupun sistemik.
Kunci keberhasilan regenerasi jaringan periodontal adalah menstimulasi sel progenitor untuk mengisi defek atau kerusakan.
Proses penyembuhan luka jaringan periodontal melibatkan fibroblas gingiva, sel epitel gingiva, ligamen periodontal, dan 2 Pada proses penyembuhan luka terdapat sel yang muncul ketika proses proliferasi terjadi yaitu sel fibroblas.
Pada fase prolifrasi fibroblas berperan dalam proses penyembuhan luka terbagi atas beberapa bagian yaitu epitelisasi, fibroplasia, dan Fibroblas sering ditemukan pada jaringan ikat dan mensintesis komponen matriks ekstraseluler .
olagen, elastin, retikule.
, dan beberapa makromolekul anionik .
likosaminoglikans, proteoglikan.
serta glikoprotein multiadhesiv, laminin, dan fibronektin yang dapat mendorong perlekatan sel pada substrat.
Salah satu fungsi fibroblas adalah pembentuk substansi dasar dan pembentuk serabut kolagen.
Vitamin D merupakan hormon sekosteroid yang disintesis melalui reaksi fotokimia dari radiasi sinar ultraviolet pada sel kulit dan melalui konsumsi makanan.
Vitamin D memiliki efek imunomodulator, antiinflamasi, antiproliferasi, dan apoptosis sel, sehingga terpenuhinya kebutuhan vitamin D dapat menurunkan resiko terjadinya penyakit gingivitis dan periodontitis kronis.
Menurut studi observasional cross-sectional menunjukan bahwa kurangnya vitamin D dapat dikaitkan dengan peningkatan resiko periodontitis kronis dan bahwa dengan vitamin D saja, atau dengan vitamin D bersama dengan kalsium dapat membantu menjaga kesehatan periodontal, dapat meningkatkan kepadatan mineral rahang, dan dapat menghambat inflamasi resorpsi pada tulang alveolar.
Tinjauan Pustaka Periodontitis Periodontitis adalah suatu penyakit inflamasi destruktif pada jaringan pendukung gigi yang disebabkan oleh mikroorganisme spesifik, yang menyebabkan kerusakan progresif pada ligamen periodontal dan tulang alveolar dengan manifestasi klinis terbentuknya poket, kegoyangan gigi, hilangnya perlekatan dan resesi gingiva (Tamara et al.
, 2.
Gambaran klinis yang membedakan periodontitis dengan gingivitis adalah hilangnya perlekatan .
ttachment los.
2 Periodontitis merupakan faktor resiko yang berperan terhadap gangguan fungsi pengunyahan dan hilangnya gigi, kelainan yang sering dijumpai dan terjadi pada manusia.
Secara umum penyakit periodontal disebabkan oleh bakteri plak pada permukaan gigi, dimana plak berupa lapisan tipis biofilm yang berisi kumpulan mikroorganisme patogen seperti Porphyromonas gingivalis.
Actinobacillus actinomycetemcomitans.
Prevotela intermedia.
Tannerella forsythia serta Fusobacterium nucleatum yang merupakan deposit lunak.
Fibroblas Sel fibroblas (L.
fibra, serat: Yunani.
Blatos, benih: Lati.
merupakan sel yang paling umum ditemui pada jaringan ikat dan mensintesis beberapa komponen matriks ekstraseluler .
olagen, .
likosaminoglikans, proteoglikan.
serta glikoprotein multiadesif, laminin dan fibronektin yang dapat mendorong perlekatan sel pada substrat.
Di samping itu, sel fibroblas mensekresikan sitokin dan beberapa faktor pertumbuhan .
rowth factor.
diantaranya dapat menstimulasi proliferasi sel dan menghambat proses diferensiasi.
Fibroblas merupakan sel induk yang berperan membentuk dan meletakkan serat-serat dalam matriks terutama serat kolagen.
Vitamin D Vitamin D termasuk dalam kelompok secosteroid larut lemak yang berasal dari Karakteristik secosteroid adalah adanya ikatan yg rusak pada salah satu cincin Sampai hari ini, telah ditemukan lebih dari 50 metabolit vitamin D dengan aktivitas biologi yang bervariasi.
Karakteristik vitamin D adalah aktivitas hormonalnya.
Metabolit aktifnya disintesis di ginjal dan hati dan ditransportasikan melalui darah ke target organ dan jaringan, seperti epitel intestinal dan tulang.
Vitamin D terbagi dalam 2 bentuk yaitu vitamin D2 .
dan vitamin D3 (Cholecalsifero.
Vitamin D2 bersumber dari radiasi UV pada ergosterol yang merupakan bentukan steroid yang terletak di beberapa tanaman, namun didominasi oleh Sedangkan Vitamin D3 disintesis melalui radiasi UV.
Oleh karena itu sumber vitamin D pada manusia dapat diperoleh dari berbagai sumber seperti paparan sinar matahari, asupan makanan yang bayak mengandung vitamin D3 seperti kuning telur, minyak ikan, makanan yang telah difortifikasi .
dan sereal serata suplemen vitamin (Vitamin D2 dan D.
Vitamin D3 lebih meningkatkan kadar 25(OH)D sebanyak 0,5-2,5 kali lebih besar dibandingkan vitamin D2.
Vitamin D3 lebih dapat meningkatkan konsentrasi serum 25(OH)D dibandingkan vitamin D2, karena vitamin D3 langsung di metabolisme di hati dan ginjal.
Metabolisme Vitamin D Prekusor vitamin D terutama didapatkan dari 2 sumber yaitu sintesis endogen dan Pada sintesis endogen, cholecalciferol .
itamin D.
disintesis dari 7- dehydrocholesterol di kulit pada saat terpapar sinar ultraviolet B dari sinar matahari.
Vitamin D yang dari makanan sebagaian besar didapatkan dalam bentuk vitamin D3 .
umber hewan.
dan atau sebagai ergocalciferol .
itamin D.
, prekusor utama didapatkan pada tumbuhan .
Adapun Protein yang bertugas membawa berbagai jenis vitamin D yang disebut Vitamin D Binding Protein (DBP).
DBP mempunyai afinitas dan kapisitas yang tinggi terhadap vitamin D, membawa 95-99% total 25-(OH)D, sebagian kecil lainnya dibawa oleh albumin dan lipoprotein melalui ikatan nonspesifik yang lemah.
Vitamin D, dari makanan maupun kulit dimetabolisme di hati menjadi 25(OH)D oleh enzim 25hidroksilase dan akan tersedia sebagai cadangan di sirkulasi dengan waktu paruh 2-3 Di dalam darah, 25(OH)D terikat dengan DBP membentuk komplek 25(OH)DDBP.
Proses metabolisme kedua terjadi di ginjal, dimana 25(OH)D mengalami hidroksilasi pada C-1, membentuk metabolit teraktif yaitu 1,25-dihydroxyvitamin D .
, dan juga pada C-24 membentuk metabolit inaktif yaitu 24,25-dihydroxyvitamin D .
2 Calcitriol terikat pada reseptor inti sel, vitamin D receptor (VDR), yang ada di ginjal, usus kecil dan tulang.
Di ginjal, 1,25(OH)2D menstimulai reabsorpsi kalsium tubulus proksimal.
Di usus kecil, 1,25(OH)2D menstimulasi absorpsi kalsium dan 1,25(OH)2D dan hormon paratiroid memobilisasi kalsium dari jaringan tulang dengan cara menstimulai osteoklas.
Tikus Wistar (Rattus norvegicu.
Tikus wistar (Rattus norvegicu.
merupakan salah satu hewan coba yang banyak digunakan dalam penelitian.
Tikus wistar (Rattus norvegicu.
baik digunakan dalam penelitian karena mudah dipelihara dan mudah berkembang biak, sehingga cepat mendapatkan hewan coba yang seragam dan mudah dikelola di laboratorium (Masrur Tikus wistar (Rattus norvegicu.
termasuk hewan nokturnal atau aktif di malam hari dan sosial.
Salah satu faktor yang mendukung kelangsungan hidup tikus putih dengan baik ditinjau dari segi lingkungan adalah temperatur dan kelembaban.
Temperatur yang baik untuk tikus putih yaitu 19oC Ae 23oC dengan kelembaban 40-70 %.
Ciri-ciri dari tikus wistar (Rattus norvegicu.
, yaitu bertubuh panjang dengan kepala lebih sempit, telinga tebal dan pendek dengan rambut halus, mata berwarna merah, dan ekornya tidak pernah lebih panjang dari tubuhnya.
Bobot badan tikus jantan pada umur dua belas minggu mencapai 240 gram sedangkan betinanya mencapai 200 gram.
Tikus memiliki lama hidup berkisar antara 4-5 tahun dengan berat badan umum tikus jantan berkisar antara 267-500 gram dan betina 225-325 gram.
METODE PENELITIAN
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental laboratoris yang dilakukan secara in vivo, menggunakan rancangan penelitian post test-only control group design.
Jumlah sampel yang digunakan adalah 27 ekor tikus wistar berusia 8-9 minggu dan berat badan 100-200 gr.
Instrumen penelitian pengujian pengaruh pemberian vitamin D 2000 IU terhadap penyembuhan luka gingiva tikus wistar dengan dilakukan pengamatan jumlah sel fibroblas pada gingiva tikus yang periodontitis setelah diberikan vitamin D 2000 IU.
Tabel 1.
Hasil Analisis Deskriptif Data Jumlah Fibroblast Antar Kelompok
Kelompok
Rerata
Maks Min K0-7
K0-14
K0-28
K1-7
K1-14
K1-28
P1-7
P1-14
P1-28
83,00
103,33
143,00
79,33
61,33
52,00
105,00
123,33
134,67
5,00
10,40
7,55
4,04
5,51
6,56
15,00
12,58
5,51
88,00
115,00
150,00
83,00
67,00
58,00
120,00
135,00
140,00
78,00
95,00
135,00
75,00
56,00
45,00
90,00
110,00
129,00
Tabel 2 Hasil Uji Normalitas Data Jumlah Fibroblast Antar Kelompok
Kelompok
K0-7
1,000
K0-14
0,463
K0-28
0,780
K1-7
0,726
K1-14
0,900
K1-28
0,747
P1-7
1,000
P1-14
0,780
P1-28
0,900
Data jumlah fibroblast diuji normalitasnya dengan Shapiro-Wilk, pada tabel 5.
2 terlihat semua data terdistribusi normal .
>0,.
Tabel 3 Hasil Uji Homogenitas Variabel Fibroblas 0,474 Data jumlah fibroblast diuji homogenitasnya dengan Uji Levene, pada tabel 5.
3 terlihat seluruh data fibroblas homogen .
>0,.
Tabel 4 Perbedaan Jumlah Fibroblast Antar Kelompok
Kelompok
Rerata
K0-7
83,00
5,00
K0-14
103,33
10,40
K0-28
143,00
7,55
K1-7
79,33
4,04
K1-14
61,33
5,51
39,515
0,000
K1-28
52,00
6,56
P1-7
105,00
15,00
P1-14
123,33
12,58
P1-28
134,67
5,51
Tabel 5.
4 menunjukkan Analisis kemaknaan dengan One Way Anova data jumlah fibroblast menunjukkan bahwa nilai F = 39,515 dan nilai p = 0,000.
Hal ini berarti bahwa terdapat perbedaan rerata jumlah fibroblast pada ke sembilan kelompok .
< 0,.
Untuk mengetahui pada kelompok mana terdapat perbedaan maka dilakukan Uji Post-Hoc
dengan Least Significant Differences (LS) Tabel 5 Perbedaan Jumlah Fibroblast Antar Kelompok
Kelompok
K0-7 dan K0-14
K0-7 dan K0-28
K0-14 dan K0-28
K1-7 dan K1-14
K1-7 dan K1-28
K1-14 dan K1-28
P1-7 dan P1-14
P1-7 dan P1-28
P1-14 dan P1-28
K0-7 dan K1-7
K0-14 dan K1-14
K0-28 dan K1-28
K0-7 dan P1-7
K0-14 dan P1-14
K0-28 dan P1-28
K1-7 dan P1-7
K1-14 dan P1-14
K1-28 dan P1-28
0,011*
0,000*
0,000*
0,022*
0,001*
0,209
0,020*
0,001*
0,131
0,615
0,000*
0,000*
0,007*
0,012*
0,260
0,002*
0,000*
0,000*
Uji lanjutan Post Hoc dengan LSD di atas diperoleh hasil sebagai berikut.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K0-7 berbeda bermakna dengan K0-14 .
erata K0-7 lebih kecil daripada K0-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K0-7 berbeda bermakna dengan K0-28 .
erata K0-7 lebih kecil daripada K0-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K0-14 berbeda bermakna dengan K0-28 .
erata K0-14 lebih kecil daripada K0-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K1-7 berbeda bermakna dengan K1-14 .
erata K1-7 lebih besar daripada K1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K1-7 berbeda bermakna dengan K1-28 .
erata K1-7 lebih besar daripada K1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K1-14 tidak berbeda bermakna dengan K1-28 .
erata K1-14 lebih besar daripada K1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok P1-7 tidak berbeda bermakna dengan P1-14 .
erata P1-7 lebih kecil daripada P1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok P1-7 tidak berbeda bermakna dengan P1-28 .
erata P1-7 lebih kecil daripada P1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok P1-14 tberbeda bermakna dengan P1-28 .
erata P1-14 lebih kecil daripada P1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K0-7 tidak berbeda bermakna dengan K1-7 .
erata K0-7 lebih besar daripada K1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K0-14 berbeda bermakna dengan K1-14 .
erata K0-14 lebih besar daripada K1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K0-28 berbeda bermakna dengan K1-28 .
erata K0-28 lebih besar daripada K1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K0-7 berbeda bermakna dengan P1-7 .
erata K0-7 lebih kecil daripada P1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K0-14 berbeda bermakna dengan P1-14 .
erata K0-14 lebih kecil daripada P1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K0-28 tidak berbeda bermakna dengan P128 .
erata K0-28 lebih kecil daripada P1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K1-7 berbeda bermakna dengan P1-7 .
erata K1-7 lebih kecil daripada P1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K1-14 berbeda bermakna dengan P1-14 .
erata K1-14 lebih kecil daripada P1-.
Rerata jumlah fibroblast kelompok K1-28 berbeda bermakna dengan P1-28 .
erata K1-28 lebih kecil daripada P1-.
Kelompok kontrol I (K.
tikus sehat diberi vitamin D 2000 IU diobservasi hari ke 7 (K.
, hari ke 14 (K.
dan hari ke 28 (K.
kelompok kontrol II (K.
tikus wistar yang diinduksi periodontitis tanpa pemberian suplemen tambahan yang diobservasi pada hari 7 (K.
, hari ke 14 (K.
dan hari ke 28 (K.
kelompok perlakuan (P.
tikus wistar diinduksi periodontitis kemudian pemberian vitamin D 2000 IU diobservasi pada hari 7 (P.
, hari ke 14 (P.
dan hari ke 28 (P.
PEMBAHASAN
Hasil pengujian menggunakan uji One way anova untuk mengetahui perbedaan antar kelompok perlakuan didapatkan hasil yang menunjukan bahwa bahwa nilai F = 39,515 dan nilai p = 0,000.
Hal ini berarti bahwa terdapat perbedaan rerata jumlah fibroblast pada ke sembilan kelompok .
< 0,.
Hasil pengujian menggunakan uji post-Hock menunjukkan bahwa terdapat perbedaan kadar fibroblast antar kelompok kontrol.
Untuk menguji pemberian vitamin D 2000 IU ini dilakukan pada subjek 27 ekor tikus putih galur Wistar (Rattus norvegicu.
Sampel diambil dari populasi terjangkau dengan cara simple random sampling terdiri dari 3 .
kriteria yaitu kriteria inklusi (Tikus putih jantan.
Galur Wistar.
Umur 8-9 minggu.
Berat 100-200 gra.
, kriteria eksklusi (Tikus saki.
dan kriteria drop out (Tikus mati selama penelitia.
Berdasarkan hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ada pengaruh pemberian vitamin D pada tikus wistar yang diinduksi bakteri Porphyromonas gingivalis (P.
menyebabkan meningkatnya fibroblas sehingga proses penyembuhan periodontitis menjadi lebih cepat.
KESIMPULAN
Pemberian vitamin D menyebabkan sel fibroblas lebih besar pada hari ke-28 dibanding hari ke-7 dan pemberian vitamin D menyebabkan sel fibroblas lebih besar pada hari ke28 dibanding kontrol pada tikus wistar (Rattus norvegicu.
yang diinduksi periodontitis DAFTAR PUSTAKA