Seminar Nasional Politani Kupang Ke-7
Kupang, 05 Desember 2024
STATUS AKROSOM SPERMATOZOA BABI DALAM PENGENCER BERBEDA YANG
DIPRESERVASI SELAMA 3 HARI PADA SUHU 16 EE
Hermilinda Parera1*.
Victor Lenda1.
Julita Merta Yasa1.
Imelda Djani1 Politeknik Pertanian Negeri Kupang.
Program Studi Kesehatan Hewan Jurusan Peternakan Jl.
Prof.
Dr.
Herman Yohanes Lasiana Kupang P.
Box.
Kupang 85011 *e-mail: hermilinda.
parera@staff.
ABSTRAK
Tujuan dari penelitian ini untuk mengevaluasi kualitas dan keutuhan akrosom spermatozoa babi dalam pengencer berbeda yang di preservasi selama tiga hari pada suhu 16EE.
Semen diperoleh dari 3 ekor pejantan berusia 1,5 1,8 tahun yang dikoleksi dua kali per minggu.
Tiga kelompok pengencer yang digunakan adalah: Kelompok I :TCF EM KT .
ris sitrat fruktosa ekstrak mesocarp buah lontar kuning telu.
Kelompok II: TCF EM .
ris sitrat fruktosa ekstrak mesocarp buah lonta.
, dan kelompok i: TCF .
ris sitrat fruktos.
Semen disimpan selama 24, 48 dan 72 jam.
Penelitian ini menggunakan rancangan acak lengkap pola faktorial dan lima ulangan.
Parameter yang diukur adalah motilitas, viabilitas, keutuhan tudung akrosom.
Analisis data dilakukan dengan Anova, dilanjutkan uji Duncan jika terdapat perbedaan antar perlakuan.
Hasil penelitian menunjukan motilitas spermatozoa babi menurun secara signifikan (P<0,.
seiring bertambahnya waktu penyimpanan pada suhu Pengencer TCF EM KT menunjukkan motilitas yang lebih tinggi dari hari pertama hingga ketiga dibandingkan TCF EM dan TCF.
Rata-rata viabilitas spermatozoa selama 72 jam penyimpanan berkisar antara 77% - 83% dengan viabilitas tertinggi pada pengencer TCF EM KT (P<0,.
Penurunan viabilitas terbesar terjadi pada pengencer TCF .
,33%), diikuti TCF EM .
,17%) dan TCF EM KT .
,17%).
Keutuhan akrosom juga menurun selama penyimpanan, dengan penurunan terbesar pada TCF.
Keutuhan akrosom pada pengencer TCF EM KT lebih baik dibandingkan kedua pengencer lainnya Kata kunci: Keutuhan akrosom.
Spermatozoa babi.
Suhu 16oC.
Tris citrat fructosa
PENDAHULUAN
Inseminasi Buatan (IB) pada ternak babi (Sus scrofa domestic.
merupakan teknologi reproduksi yang paling banyak digunakan dalam industri peternakan untuk meningkatkan populasi ternak babi, memperbaiki mutu genetik dan meningkatkan produktivitas ternak dengan memanfaatkan pejantan unggul.
Keberhasilan IB sangat bergantung pada kualitas spermatozoa yang digunakan, dimana umumnya IB pada babi menggunakan semen cair.
Semen cair yang digunakan harus berkualitas dan memenuhi standar minimal SNI.
Semen cair merupakan semen segar yang diberi tambahan bahan pengencer untuk mempertahankan kualitas spermatozoa selama waktu penyimpanan.
Penelitian sebelumnya menggunakan pengencer tris citrat fructosa dapat mempertahankan motilitas dan viabilitas spermatozoa babi (Parera & Lenda, 2022, 2.
Kualitas spermatozoa meliputi motilitas, viabilitas, integritas membran plasma serta integritas akrosom dan yang tidak kalah pentingnya untuk mengetahui kemampuan fertilitas spermatozoa.
Salah satu aspek kritis dalam menjaga kualitas spermatozoa adalah integritas akrosom, yaitu bagian dari spermatozoa yang mengandung enzim-enzim esensial untuk penetrasi oosit saat fertilisasi.
Akrosom terletak di ujung kepala spermatozoa dan dilindungi oleh membran yang sensitif terhadap kerusakan selama proses penyimpanan.
Kerusakan akrosom dapat menyebabkan kegagalan reaksi akrosom, mengurangi fertilitas, dan menurunkan potensi inseminasi buatan.
Spermatozoa yang disimpan pada suhu dingin mengalami kejutan dingin .
old shoc.
yang menyebabkan perubahan dalam konsentrasi cairan intraseluler dan ekstraseluler, mengakibatkan stres osmotik, yang berpotensi merusak Seminar Nasional Politani Kupang Ke-7 Kupang, 05 Desember 2024 struktur membran dan akrosom.
Suhu dingin dapat menurunkan kandungan fosfolipid, yang merupakan komponen utama membran, sehingga mengganggu stabilitas membran sel dan mengurangi kemampuannya dalam mempertahankan integritas akrosom.
Selain itu penyimpanan pada suhu dingin sering kali diikuti oleh penurunan motilitas spermatozoa akibat kerusakan mitokondria, yang mengakibatkan penurunan produksi ATP .
denosine triphosphate yang diperlukan untuk motilitas dan fungsi akrosom.
Spermatozoa yang tidak aktif atau mati tidak dapat melakukan reaksi akrosom dengan baik, sehingga integritas akrosom menurun.
Akrosom pada kepala spermatozoa merupakan bagian penting yang mengandung enzim-enzim esensial untuk penetrasi oosit selama fertilisasi.
Membran akrosom yang utuh sangat penting dalam menjaga kemampuan fertilisasi spermatozoa (Fannessia et al.
, 2.
Kerusakan akrosom, terutama pada tingkat membran, dapat mengurangi kemampuan fertilisasi, menurunkan motilitas, dan menyebabkan kematian sel.
Metode yang mudah dan murah untuk menilai integritas akrosom pada spermatozoa menggunakanan pewarnaan giemsa (Shah & Yadav, 2.
Pada spermatozoa babi dengan akrosom yang utuh, pewarna giemsa akan memberikan warna yang lebih pekat .
ngu tu.
di area akrosom, menandakan keutuhan membran dan struktur protein di dalamnya.
Sebaliknya, spermatozoa dengan akrosom yang rusak akan menunjukkan pola pewarnaan yang lebih samar atau tidak tampak jelas (Ungu mud.
, menunjukkan adanya kerusakan atau hilangnya integritas membran akrosom (Prihantoko et al.
, 2.
Penelitian-penelitian sebelumnya melaporkan bahwa pewarnaan giemsa digunakan untuk menganalisis morfologi akrosom spermatozoa pada sapi, kambing, domba dan beberapa spesies unggas seperti ayam (Prihantoko et al.
, 2020.
Sun et al.
, 2020.
Yadav et al.
, 2.
Penggunaan pewarnaan ini membantu dalam membedakan akrosom yang utuh dari yang rusak, yang berperan penting dalam evaluasi kualitas semen.
Untuk meminimalkan efek negatif penyimpanan suhu rendah, penggunaan pengencer yang tepat sangat penting.
Pengencer berfungsi untuk menjaga keseimbangan osmotik, melindungi membran spermatozoa, serta menyediakan energi bagi sel.
Salah satu pengencer yang sering digunakan dalam penyimpanan semen babi adalah tris sitrat fruktosa dengan penambahan ekstrak mesocarp buah lontar dan kuning telur.
Penelitian terdahulu telah menunjukkan bahwa pengencer tris sitrat fruktosa mampu meningkatkan viabilitas dan motilitas spermatozoa selama penyimpanan pada suhu rendah.
Namun, meskipun pengencer ini efektif dalam melindungi motilitas spermatozoa, pengaruhnya terhadap integritas akrosom selama penyimpanan jangka pendek pada suhu 16AC masih memerlukan penelitian lebih lanjut.
Penelitian ini bertujuan untuk mengevaluasi pengaruh penyimpanan spermatozoa babi pada suhu 16AC selama tiga hari dalam pengencer tris sitrat fruktosa dengan tambahan ekstrak mesocarp buah lontar dan kuning telur terhadap integritas akrosom.
Pengujian ini diharapkan dapat memberikan informasi yang lebih jelas tentang efektivitas pengencer dalam melindungi akrosom dari kerusakan akibat cold shock dan kerusakan oksidatif.
Selain itu, hasil penelitian ini akan memberikan wawasan lebih lanjut tentang potensi aplikasi pengencer ini dalam program inseminasi buatan untuk Seminar Nasional Politani Kupang Ke-7
Kupang, 05 Desember 2024
meningkatkan keberhasilan fertilisasi
METODE PENELITIAN
Koleksi Sampel dan Pemeriksaan Semen Segar Penelitian ini menggunakan semen babi 3 ekor pejantan umur 1,5- 2 tahun.
Sampel semen segar diperoleh dengan metode masase.
Pasca koleksi, semen segera dibawa ke laboratorium Anatomi Patologi Politani Kupang untuk dilakukan evaluasi secara makroskopis dan mikroskopis, meliputi pemeriksaan volume .
L), warna, pH konsistensi, konsentrasi, gerakan massa, motilitas individu, dan viabilitas spermatozoa.
Semen yang memenuhi syarat dilanjutkan pengenceran hingga konsentrasi spermatozoa sebesar 250-300X106/mL, selanjutnya dibagi ke dalam kelompok perlakuan.
Pengenceran dan Perlakuan Semen Penelitian ini terdiri dari dua kelompok perlakuan yaitu kelompok perlakuaan satu yaitu lama penyimpanan terdiri dari: kelompok I: penyimpanan 24 Jam (L.
: kelompok II: penyimpanan 48 jam (L.
dan kelompok i: penyimpanan 72 jam (L.
dan kelompok perlakuan ke dua yaitu kelompok pengencer dibagi menjadi tiga:
Kelompok I yaitu: pengencer tris sitrat fruktosa dengan tambahan 5% kuning telur dan 0,01% ekstrak mesocarp buah lontar (TCF EM KT) A Kelompok II yaitu: pengencer tris sitrat fruktosa yang diberi 0,01% ekstrak mesocarp buah lontar (TCF EM) A Kelompok ke i yaitu: pengencer tris sitrat fruktosa (TCF) Pembuatan 100 ml pengencer tris sitrat fruktosa dengan komposisi 1,82% tris hidroksimetil aminometana, 1,11% asam sitrat monohidrat, 3,88% D-(-)fruktosa, 0,02% bovine serum albumin,1% penisilin streptomisin, 10% kuning telur ayam, 0,01% ekstrak mesokarp buah lontar dan 82,16% aquabidest (Parera & Lenda, 2.
Sebanyak 86,16% aquabidest dimasukan dalam gelas ukur, tambahkan tris hidroksimetil aminometana, asam sitrat monohidrat.
D-(-)fruktosa, bovine serum albumin dan penisilin streptomicin kemudian aduk hingga homogen, tambahkan kuning telur ayam dan ekstrak mesokarp buah lontar aduk hingga homogen, kemudian larutan pengencer ini dihangatkan sampai mencapai suhu 35-36EE dan semen segar siap ditambahkan pada pengencer ini (Parera & Lenda.
Selanjutnya semen yang telah diencerkan di simpan pada suhu 16oC selama tiga hari.
Pemeriksaan kualitas motilitas, viabilitas, dan tudung akrosom utuh spermatozoa dilakukan setiap hari sampai pada hari ke tiga.
Pemeriksaan Tudung Akrosom Evaluasi integritas akrosomal atau Uji Tudung Akrosom Utuh (TAU) spermatozoa dilakukan dengan menempatkan satu tetes semen di atas object glass dan diulas dengan menggunakan object glass lain membentuk sudut 45 oC dan dikeringkan dengan cara diangin-anginkan.
Preparat ulas direndam dalam staning jar yang sudah berisi formalin 5% selama 30 menit.
Preparat diangkat kemudian dicuci dengan air mengalir dan dikeringkan, kemudian rendam preparat Seminar Nasional Politani Kupang Ke-7 Kupang, 05 Desember 2024 dalam larutan giemsa selama 3 jam.
Selanjutnya preparat dicuci menggunakan air mengalir dan Tudung akrosom utuh diamati menggunakan mikroskop dengan pembesaran 400x dan dihitung minimal 200 spermatozoa, spermatozoa dengan TAU ditandai oleh ujung kepala yang berwarna gelap keunguan dan pada spermatozoa dengan TAU tidak utuh berwarna lebih terang (Yekti et al.
, 2.
Analisis Data Penelitian ini dirancang menggunakan rancangan acak lengkap pola factorial dengan 2 kelompok perlakukan dengan lima kali ulangan.
Data evalusi makroskopik dan mikroskopik semen segar dideskripsikan, sedangkan data persentase motilitas, viabilitas, integritas keutuhan tudung akrosom dianalisis dengan metode ANOVA, bila ada perbedaan dilanjutkan dengan Uji Duncan.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Motilitas Motilitas spermatozoa merupakan parameter standar semen cair babi yang digunakan untuk menentukan kualitas spermatozoa IB.
Menurut SNI 8034 .
, semen cair babi sesudah diawetkan .
pada suhu 15 AC sampai 20 AC pada hari ke- 3 menunjukan motilitas spermatozoa minimum Tabel 1 menunjukan persentase motilitas spermatozoa babi dari tiga pengencer berbeda yang disimpan selama 3 hari pada suhu 16 oC di atas 40%.
Tabel 1.
Presentase Motilitas Spermatozoa Babi dari Tiga Pengencer Pengencer TCF EM KT
TCF EM
TCF
Lama Penyimpanan (Ja.
67A1.
83 A 2.
00A .
17A2.
67A 2.
67A1.
83A0, .
67A 1.
33A1.
a,b,c Superskrib yang berbeda pada baris yang sama menunjukan perbedaa nyata(P<0,.
A,B,C Superskrib yang berbeda pada kolom yang sama menunjukan perbedaa nyata(P<0,.
Berdasarkan Tabel 1, terlihat bahwa rata-rata motilitas spermatozoa babi dari ketiga pengencer selama penyimpanan suhu 16oC menurun secara signifikan (P<0,.
seiring dengan bertambahnya lama Pengencer TCF EM KT memiliki presentase motilitas lebih tinggi dibandingkan pengencer TCF EM dan pengencer TCF.
Penurunan rataan persentase motilitas spermatozoa babi dari jam 24, ke 48 jam dan ke 72 jam selama penyimpanan sebagai berikut pengencer TCF EM KT : 5,5% dan 6,34%, pengencer TCF EM: 5,16 % dan 9% serta pengencer TCF 5,33%.
dan 23,34%.
Pengencer TCF EM KT memiliki presentase motilitas tertinggi karena selain megandung tris sitrtat dan fruktosa juga ekstrak mesocarp buah lontar yang merupakan sumber antioksidan dan kuning telur yang mengandung fosolipid, lesitin dan kolesterol.
Selama proses penyimpanan suhu dingin 16oC spermatozoa babi rentan terhadap cold shock sehingga berdampak pada kerusakan membran plasma, penurunan motilitas spermtozoa dan kematian spermatozoa.
Fosfolipid dari kuning telur dapat menggantikan lipid membran sperma yang rusak atau kehilangan fluiditas akibat perubahan suhu (Bustani & Baiee, 2.
Dengan demikian, membran sperma tetap elastis dan mampu bertahan dari Seminar Nasional Politani Kupang Ke-7 Kupang, 05 Desember 2024 stres akibat suhu dingin.
Membran sperma yang terlindungi dengan baik memungkinkan sperma tetap mempertahankan fleksibilitas dan mobilitasnya, yang sangat penting untuk pergerakan yang efektif.
Kolesterol yang terdapat dalam kuning telur juga berperan dalam menjaga integritas membran plasma sperma dengan mengurangi fase transisi lipid (Galantino-Homer et al.
, 2.
Kolesterol meningkatkan stabilitas membran dan mencegah membran menjadi terlalu kaku selama penyimpanan di suhu dingin (Farshad et al.
, 2.
Kuning telur tidak hanya berperan sebagai pelindung membran, tetapi juga menyediakan nutrisi yang mendukung metabolisme sperma (Ferramosca & Zara, 2.
Lipid dan protein dalam kuning telur dapat digunakan sebagai sumber energi selama penyimpanan dan membantu menjaga keseimbangan energi yang diperlukan untuk motilitas sperma (Shan et al.
, 2.
Fruktosa dalam pengencer semen juga menyediakan energi, tetapi tambahan lipid dari kuning telur lebih mendukung proses metabolisme lipid dalam mitokondria sperma, yang penting untuk energi jangka panjang.
Cold shock juga memicu peningkatan produksi spesies oksigen reaktif (ROS), yang dapat menyebabkan kerusakan oksidatif pada lipid dalam membran sperma.
Sehingga mengurangi kemampuan sperma untuk bergerak .
dan menurunkan viabilitas sperma (Jawad et al.
, 2.
Lesitin dalam kuning telur dan antioksidan dari ekstrak mesocarp buah lontar membantu mencegah peroksidasi lipid dengan menetralkan ROS sebelum mereka dapat menyebabkan kerusakan pada membran sperma.
Dengan mencegah peroksidasi lipid, kuning telur dan antioksidan dari ekstrak mesocarp buah lontar membantu mempertahankan integritas membran sperma selama penyimpanan pada suhu dingin.
Viabilitas Viabilitas spermatozoa, yang menunjukkan persentase sel hidup dengan membran utuh, adalah indikator penting dalam evaluasi kesuburan, karena membran yang utuh esensial untuk fungsi fertilisasi.
Spermatozoa yang mempertahankan integritas membran lebih siap untuk proses kapasitasi dan reaksi akrosom, yang krusial dalam penetrasi sel telur (Chen et al.
, 2.
Viabilitas spermatozoa dipengaruhi oleh beberapa faktor, termasuk kondisi penyimpanan, kualitas nutrisi dalam media pengencer, dan kandungan antioksidan, yang dapat membantu mencegah stres oksidatif serta kerusakan membran sel Metode pewarnaan eosin digunakan untuk menguji viabilitas spermatozoa secara sederhana dan cepat.
Prinsip dari metode ini adalah bahwa eosin, pewarna yang tidak dapat masuk ke dalam membran sel yang utuh, akan menandai hanya spermatozoa yang sudah mati atau mengalami kerusakan membran, sehingga sel mati akan tampak merah (Agarwal et al.
, 2016.
Sharma & Agarwal.
Persentase viabilitas spermatozoa babi dari tiga pengencer dapat dilihat pada tabel 2.
Tabel 2.
Persentase Viabilitas Spermatozoa Babi dari Tiga Pengencer Pengencer TCF EM KT
TCF EM
TCF
Lama Penyimpanan (Ja.
00A .
83A .
83A 2.
17A 1.
a,b,c 83A.
83A 2.
50A1.
Superskrib yang berbeda pada baris yang sama menunjukan perbedaa nyata(P<0,.
A,B,C Superskrib yang berbeda pada kolom yang sama menunjukan perbedaa nyata(P<0,.
Seminar Nasional Politani Kupang Ke-7 Kupang, 05 Desember 2024 Berdasarkan tabel 2, rata-rata persentase viabilitas spermatozoa dari tiga pengencer selama penyimpanan sampai pada jam ke 72 jam adalah 77% - 83%.
Persentase viabilitas spermatozoa babi dari pengencer TCF EM KT berbeda secara signifikan (P<0,.
lebih tinggi dibandingkan kedua pengencer lainnya.
Penurunan persentase viabilitas tertinggi dari hari 1 sampai ke 3 adalah pengencer TCF yaitu sebesar 12,33% diikuti dengan pengencer TCF EM yaitu 10,17% dan TCF EM KT yaitu 9,17%.
Metode penyimpanan spermatozoa pada suhu dingin selama 3 hari atau 72 jam dan menggunakan media tris sitrat fruktosa menyebabkan metabolisme fruktosa oleh spermatozoa melambat, sehingga energi yang disediakan mungkin tidak mencukupi untuk mempertahankan motilitas dan viabilitas yang Selain itu, akumulasi produk sampingan metabolisme fruktosa berupa asam laktat dapat menyebabkan perubahan pH lokal dan gangguan osmotik yang dapat merusak spermatozoa.
Fruktosa dalam media berfungsi sebagai sumber energi yang cepat untuk mitokondria, metabolisme yang terganggu akibat cold shock menyebabkan produksi energi yang tidak efisien (Tsujii et al.
, 2.
Setelah penyimpanan 3 hari, aktivitas mitokondria cenderung menurun, menghasilkan lebih banyak ROS dan mengurangi ketersediaan adenosine triphosphate (ATP).
Tris berfungsi sebagai penyangga untuk menjaga stabilitas pH, asam laktat yang diproduksi secara terus-menerus dapat menurunkan pH media setelah beberapa waktu.
Penurunan pH di bawah ambang batas optimal .
iasanya antara 7,2 hingga 7,.
dapat mengganggu aktivitas enzim penting dan keseimbangan ion, menyebabkan penurunan viabilitas spermatozoa.
Tris sitrat membantu menjaga kestabilan pH, namun tidak cukup untuk melindungi integritas membran lipid secara menyeluruh.
Fosfolipid membran, yang kaya akan asam lemak tak jenuh, menjadi lebih kaku pada suhu dingin, menyebabkan kebocoran ion-ion penting seperti kalsium (C.
, yang akhirnya merusak homeostasis sel dan mengganggu viabilitas spermatozoa.
Enzim-enzim yang berada di membran, seperti ATPase, terganggu oleh perubahan struktur membran, yang mengganggu metabolisme ion dan menurunkan Tudung Akrosom Utuh (TAU) Keutuhan tudung akrosom (TAU) pada spermatozoa babi memainkan peran yang sangat penting dalam keberhasilan fertilisasi.
Tudung akrosom merupakan selubung yang terdapat pada bagian kepala spermatozoa yang berfungsi sebagai lapisan pelindung yang sangat penting dalam menjaga integritas materi genetik serta mempertahankan enzim-enzim penting seperti hyaluronidase.
Keberadaan selubung ini menjamin bahwa enzim-enzim tidak dilepaskan secara prematur dan materi genetik tetap terlindungi hingga waktu fertilisasi (Breitbart & Grinshtein, 2.
Akrosom adalah organel pada kepala spermatozoa yang berisi enzim-enzim hialuronidase dan akrosin, yang diperlukan untuk menembus zona pellucida, selama proses fertilisasi (Khawar et al.
, 2.
Seminar Nasional Politani Kupang Ke-7 Kupang, 05 Desember 2024 Gambar 1.
Tanda panah menunjukan bentuk akrosom utuh dengan pewarnaan Giemsa.
Penilaian keutuhan akrosom spermatozoa menggunakan pewarnaan giemsa, intensitas warna ungu yang dihasilkan menunjukkan kondisi integritas akrosom.
Warna ungu pekat (Gambar .
menunjukkan akrosom yang utuh, di mana membran akrosom yang stabil memungkinkan penyerapan pewarna secara optimal, mengindikasikan perlindungan yang baik terhadap enzim-enzim seperti hyaluronidase yang diperlukan untuk fertilisasi.
Sebaliknya, warna ungu pucat menunjukkan adanya kerusakan pada membran akrosom, yang menyebabkan kebocoran dan distribusi pewarna yang tidak Presentase Tudung Akrosom Utuh (TAU) dapat dilihat pada tabel 3.
Tabel 3.
Presentase Tudung Akrosom Utuh (TAU) Pengencer TCF EM KT
TCF EM
TCF
Lama Penyimpanan (Ja.
94,00 A1.
67A 1.
83A 0.
50A1.
33A 2.
17A 1.
50A1.
33A 1.
17A 1.
a,b,c Superskrib yang berbeda pada baris yang sama menunjukan perbedaa nyata(P<0,.
A,B,C Superskrib yang berbeda pada kolom yang sama menunjukan perbedaa nyata(P<0,.
Berdasarkan tabel 3, menunjukan persentase rataan keutuhahan akrosom pada penyimpanan suhu 16oC selama tiga hari berbeda nyata (P<0,.
dimana spermatozoa dalam pengencer TCF EM KT memiliki persentase keutuhan akrosom lebih tinggi dari spermatozoa dalam pengencer TCF EM dan TCF.
Penurunan keutuhan akrosom dari jam ke 24 ke jam 48 dan 72 jam dari masing-masing pengencer sebagai berikut: TCF EM KT yaitu dari jam ke 24 ke jam 48 sebesar 5,5% dan ke jam 72 sebesar 4%.
Pengencer TCF EM dari jam ke 24 ke jam 48 sebesar 7,55% dan ke 72 jam sebesar 9%.
Pengencer TCF dari jam ke 24 ke jam 48 sebesar 8,66% dan ke 72 jam sebesar 7%.
Spermatozoa dalam pengencer TCF EM KT menunjukkan penurunan paling rendah dalam integritas akrosom, yang mengindikasikan bahwa kombinasi nutrisi dalam pengencer ini lebih efektif dalam mempertahankan kualitas spermatozoa selama penyimpanan karena kuning telur mengandung lipid dan fosfolipid yang efektif melindungi membran akrosom dari kerusakan akibat cold shock dan stres oksidatif.
Tuncer et al.
dan Gadea et al.
menyatakan fosfolipid dalam kuning telur membantu menjaga stabilitas membran dan mencegah kerusakan akibat cold shock.
Penambahan antioksidan beta-karoten yang terkandung dalam ekstrak mesocarp buah lontar pada pengencer ini Seminar Nasional Politani Kupang Ke-7 Kupang, 05 Desember 2024 mampu mengurangi peroksidasi lipid dan kerusakan membran yang disebabkan oleh spesies oksigen reaktif (ROS) selama penyimpanan.
Martynez-Alborcia et al.
Beta-karoten membantu memperlambat peroksidasi lipid pada membran spermatozoa dan menjaga keutuhan akrosom.
Lebihl anjut Jimynez-Rabadyn et al.
menegaskan pentingnya penggunaan antioksidan dalam pengencer untuk meningkatkan viabilitas dan keutuhan spermatozoa selama penyimpanan, khususnya pada suhu Pengencer TCF EM dan TCF menunjukkan penurunan yang lebih signifikan, terutama pada periode antara jam ke-48 dan jam ke-72, yang menunjukkan bahwa tanpa tambahan kuning telur, spermatozoa lebih rentan terhadap kerusakan.
Pengencer TCF EM juga memberikan perlindungan yang baik, namun tanpa kuning telur, tingkat perlindungan terhadap membran akrosom lebih rendah, yang menyebabkan penurunan keutuhan akrosom lebih signifikan setelah 48 dan 72 jam penyimpanan.
Pengencer TCF tanpa tambahan pelindung seperti kuning telur dan ekstrak buah lontar menunjukkan penurunan persentase keutuhan akrosom yang paling tinggi, menandakan bahwa tanpa perlindungan lipid dan antioksidan, membran spermatozoa lebih rentan terhadap kerusakan oksidatif dan cold shock selama penyimpanan suhu rendah.
KESIMPULAN
Berdasarkan hasil penelitian ini dapat disimpulakan bahwa dari ketiga pengencer ini pengencer dengan bahan tris, sitrat fruktosa yang diberi ekstrak mesocarp buah lontar dan kuning telur (TCF EM KT) memberikan hasil yang lebih tinggi dari kedua pengencer lainnya dimana selama 72 jama dapat mempertahankan keutuhan tudung akrosom sebesar 84,50%, motilitas sebesar 76.
83% dan viabilitas sebesar 83.
DAFTAR PUSTAKA