35

JURNAL KAJIAN PEMBELAJARAN DAN KEILMUAN
Volume 8 Nomor 1 Tahun 2024 Halaman 35- 40
p-ISSN: 2579-4299, e-ISSN: 2621-0533, DOI: 10.26418/jurnalkpk.v8i1.63725
https://jurnal.untan.ac.id/index.php/jurnalkpk

ANALISIS UJI KADAR β-KAROTEN PADA BUAH PATIKALA (Etlingera elatior
(JACK) R.M. SMITH) SEBAGAI ALTERNATIF SUMBER VITAMIN A DAN
ANTIOKSIDAN
Andi Ifriany Harun
Pendidikan Kimia, FKIP Universitas Tanjungpura, Pontianak
Article Info
Article history:
Received: 15 Maret 2023
Revised: 5 April 2024
Accepted: 27 April 2024
Keywords:
Antioxidants
Β-Carotene
Patikala
Provatamin A

ABSTRACT
The high level of pollution in Indonesia causes a large number of free
radicals that have the potential to cause several diseases. To overcome
this, antioxidants are needed which function to prevent heart disease,
anti-aging, strengthen the immune system, protect the nervous system,
and nourish the eyes. One known antioxidant is - carotene. This study
aimed to analyze the -carotene content of patikala fruit (Etlingera
elatior (Jack) R.M. Smith) originating from Pangandaran (West Java)
as an alternative source of vitamin A and antioxidants. The form of
research is experimental. The research parameters were linearity test,
detection limit and quantitation, system suitability test and
determination of -carotene levels. Analysis of pure -carotene standard
solution using HPLC obtained the results that the maximum absorption
occurred at max 450 nm, linearity (r) was 0.9999 or close to the value
1. Determination of -carotene content was carried out in duplicate and
the retention time of patikala fruit was 8,564 minutes and 8,597
minutes, respectively. levels of -carotene obtained by 0.1 ppm or 10
mg/100 g, while the need for -carotene per day is 5-6 mg/100 g,
consuming patikala fruit of 50 grams per day can meet the daily needs
of -carotene.
Copyright © 2024 Andi Ifriany Harun.

 Corresponding Author:
Andi Ifriany Harun
Universitas Tanjungpura, Pontianak
Email: andi.ifriani@fkip.Untan.ac.id

PENDAHULUAN
Pencemaran udara adalah salah satu sumber pencemar yang sangat mengkhawatirkan.
Tingginya tingkat pencemaran udara, menyebabkan Indonesia menjadi negara ketiga tertinggi yang
mengalami pencemaran udara di dunia. Emisi dari kendaraan bermotor merupakan faktor utama
pencemaran udara (85%), selebihnya adalah kebakaran hutan dan industri.
Oksigen dibutuhkan sel tubuh, tetapi oksigen yang sudah teroksidasi dan melepaskan radikal
bebas, potensial meruak sel-sel tubuh yang sehat. Radikal bebas terbentuk dari zat kimia yang
kehilangan atau mendapatkan elektron sehingga elektronnya menjadi tidak berpasangan dan tidak
stabil. Adanya radikal bebas yang tidak stabil ini, dapat menyebabkan kanker. Untuk mencegah kanker
akibat radikal bebas, digunakan antioksidan, suatu zat yang berfungsi menetralkan radikal bebas,
dimana antioksidan tersebut akan teroksidasi terlebih dahulu untuk melindungi sel-sel yang sehat,
sehingga kebutuhan akan antioksidan yang cukup sangat penting

36

Beberapa buah-buah dan sayuran mengandung antioksidan yang berfungsi bagi kesehatan
diantaranya mencegah penyakit jantung, anti penuaan, menguatkan sistem imun, melindungi sistem
syaraf, dan menyehatkan mata. Beta karoten adalah salah satu antioksidan yang terkenal.
β karoten atau yang dikenal sebagai provitamin A merupakan pigmen yang memberi warna
pada tumbuhan, yaitu pigmen orange. Konsumsi β-karoten dalam kadar yang diperlukan, dapat
mencegah terjadinya penyakit arteri koroner, stroke, dan penyakit yang berhubungan dengan darah dan
jantung. Umumnya buah dan sayuran yang berwarna orange diperkirakan mengandung β karoten.
Selama ini, pemanfaatan buah patikala masih sebatas sebagai bahan tambahan pada makanan
khas suatu daerah, misalnya, di Sulawesi Selatan (khususnya di Palopo), buah patikala digunakan untuk
membuat kapurung, suatu makanan tradisional, digunakan pada pembuatan palu mara. Di Kolaka
(Sulawesi Tengah) dibuat jus herbal yang mempunyai rasa asam yang khas.
Beberapa penelitian yang terkait, menunjukkan efek antimikrobanya besar terhadap bakteri
E. Coli, Stap. Aureus, B. Subtilis, Strep. mutans, aeruginosa dengan nilai Rf 0,63 dan daun patikala
mengandung zat antimikroba golongan flavonoid (Yenni, F.N, 2017;13). Penelitian lain yang
dilakukan oleh AR. Ahmad (2017;33) menunjukkan bahwa pada buah mengandung flavonoid (1,77%
b/b) dan fenolik (2,29 % b/b , sedangkan pada daun mengandung flavonoid (5,45 % b/b)dan fenolik
sebesar 6,29 % b/b. Penelitian lain menunjukkan hasil bahwa ekstrak buah patikala memberikan
konsentasi hambat minimal sebesar 10 % terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus (Fadel M.,
2016;25).
β-karoten memiliki 11 ikatan rangkap (rumus molekulnya C40H56) yang menunjukkan pigmen
warna orange pada buah dan sayuran, yang jika berikatan dengan klorofil maupun xantofil, akan
menyerap cahaya dalam spektrum cahaya orange atau merah dan akan menimbulkan warna hijau, ungu
atau biru (Hock-Eng, et.all., 2011;35).
Berdasarkan pertimbangan di atas, dimana belum ada penelitian tentang kandungan β-karoten pada
buah patikala dan karena buah patikala berwarna kuning-orange, maka dilakukan penelitian analisis uji
kadar β-karoten pada buah patikala (Etlingera elatior (Jack) R.M. Smith). Tujuannya adalah untuk
menganalisis kadar β-karoten pada buah patikala (Etlingera elatior (Jack) R.M. Smith) sebagai
alternatif sumber vitamin A dan antioksidan.
METODE PENELITIAN
Bahan dan Alat Penelitian
Kebutuhan bahan sebagai berikut : buah patikala, (THF), butil hidroksi toluena (BHT) 0,1 %
dalam aseton, petroleum eter p.a, padatan β-karoten (E. Merck), kertas saring whatman 42, aluminium
foil dan aquabidest.
Kebutuhan alat adalah HPLC, , sentrifuge dingin Universal 320 R, tabung sentrifuge, neraca
analitik, vortex, dan chamber.
Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian uji betakaroten pada buah patikala di lakukan pada bulan Mei – November 2019
bertempat di laboratorium kimia dan Laboratorium PT Saraswanti Indo Genetech (SIG) di Kabupaten
Bogor, Jawa-Barat.
Prosedur Penelitian
Preparasi Standar Induk β-karoten 1000 ppm
Larutan baku β-karoten dengan konsentrasi 1000 ppm sebagai larutan stok dibuat dengan cara
25 mg β-karoten ditimbang dan dimasukkan ke labu takar 100 mldan dicukupkan volumenya dengan
heksan.
Pembuatan larutan baku β-karoten 1000 ppm dilakukan dengan cara ditimbang dengan teliti 25
mg β-karoten, dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml, ditambahkan larutan heksan hingga tanda batas.
Encerkan larutan baku sampai diperoleh konsentrasi 0,05, 0,075, 0,1, 0,25, 0,5, 1 dan 2,5 ppm. Larutan
yang sudah diencerkan tersebut, siap untuk diinjeksikan ke dalam kolom HPLC.
Pengujian β-karoten
Ekstraksi secara refluks
Buah Patikala di timbang sebanyak 0,5-1 g, ditambahkan aquabidestilata. Kemudian
ditambahkan 1 g Na-ascorbat atau 10 ml asan ascorbat atau 0,1 g pyrogallol atau 100 mg hidroquinon.
Kemudian ditambahkan etanol 95% sebanyak 4x bobot sampel (≥ 40 ml) dan KOH 100% sebanyak 1

37

kali bobot sampel. Diaduk sampai homogen dan ditambahkan batu didih, lalu direfluks dalam penangas
air suhu 80oC selama 30 menit, aduk dan didinginkan.
Ekstraksi karotenoid ke Petroleum Eter (PE) dalam Corong pisah
Diekstraksi dalam corong pisah dengan 70 ml Petroleum eter atau 50 ml heksan atau 70 ml
petroleum eter : heksan (2:1) atau 100 ml heksan : aseton (60 : 40) lalu dikocok. Lapisan atas yang
terbentuk , dipindahkan ke dalam corong pisah untuk sampel yang mengandung lemak tinggi
ditambahkan 50 ml KOH 5% ke dalam corong pisah. Diekstrak kembali dengan 2 x 40 ml larutan
pengekstrak. Ekstrak di cuci denga aquabidestilata hingga bebas basa. Lalu ditambahkan Natrium
Sulfat dana disaring melalui kertas saring.
Ekstrak di evaporator (40oC) dan dialirkan gas nitrogen. Residu yang terbentuk ditambahkan
dengan fase gerak dan dimasukkan ke dalam labu takar 10 ml, lalu di saring menggunakan kertas saring
whatman 0,45 µm ke dalam vial untuk diinjeksikan ke HPLC.
Uji Linieritas
Uji ini dilakukan dengan membuat kurva antara konsentrasi dan luas puncak dengan persamaan
y = a + bx. Larutan baku dibuat beberapa konsentrasi yaitu 0.2; 0.4; 0.6; 0.8; 1.0; 2.5; 5; 7.5 dan 10
ppm, lalu disuntikkan ke dalam HPLC sebanyak 20 μl. Persamaan ya=garis yang sudah diregresi,
dihitung nilai korelasinya (r).
Uji Batas deteksi dan batas kuantitasi
Uji ini dilakukan dengan cara menimbang 10 mg β-karoten dan dicukupkan volumenya dengan
kloroform dalam labu takar 50 ml, selanjutnya diencerkan dengan kloroform hingga diperoleh
konsentrasi 10 dan 0,5 ppm. Masing-masing konstentrasi disuntikkan ke HPLC sebanyak 20 μl. Dengan
kondisi HPLC optimum, di ukur luas puncak dan dilakukan perhitungan nilai simpangan baku relatif.
Uji ini dilakukan untuk mengetahui kadar terendah yang dideteksi oleh HPLC.
Analisis kuantitatif dengan HPLC
Uji kesesuaian sistem
Uji ini dilakukan dengan cara menyuntikkan 20 μl larutan baku sebanyak 5 kali ke HPLC. Nilai
simpangn baku diperoleh dengan cara mengukur luas puncak dari hasil HPLC (kondisi optimum).
Tujuan uji ini adalah untuk melihat apakah memberikan hasil analisis tunggal dengan kondisi, metode
dan alat yang digunakan.
Penentuan konsentrasi β-karoten.
Larutan baku dan uji yang sudah disonikasi (10 menit) disuntikkan ke HPLC. Kromatogram
yang terbentuk, dilakukan pengukuran luas puncak dan dihitung konsentrasinya menggunakan rumus :
Area
{(
) 𝑥 𝑉𝐿 𝑥 𝐹𝑃}
𝑚𝑔
slop
𝑘𝑎𝑑𝑎𝑟 𝛽 − 𝑘𝑎𝑟𝑜𝑡𝑒𝑛 ( ) =
𝑙
Bobot sampel
Dimana:
VL
= Volume Sampel
FP
= Faktor Pengenceran
HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN
Buah patikala berasal dari Pangandaran (Jawa-Barat). Pada waktu penelitian, terdapat
kesulitan dalam memperoleh buah ini, karena kebetulan belum berbuah. Di kota Pontianak sendiri, buah
ini bisa ditemukan di pasar-pasar traditional, walaupun belum banyak orang yang mengenal keberadaan
buah patikala. Buah patikala yang berasal dari Pangandaran ini adalah buah patikala yang tumbuh di
hutan atau sering disebut honje hutan, yang memiliki warna merah kehitaman atau merah maron.
HPLC yang digunakan untuk analisis kadar β-karoten menggunakan kolom kromatografi
Lichrospher Rp18 125 x 4 mm; 5 µm dengan detektor PDA. Gradien yang digunakan adalah gradien
isokratik. Serapan maksimum terjadi pada λ 450 nm, dan perbandingan fase gerak 50:40:5 (metanol :
acetonitril : THF), jumlah yang diinjeksikan sebanyak 20 µl dengan laju alir 1.0 ml/menit. Kombinasi
fase gerak memberikan resolusi naik dan waktu retensi cepat.
Dari hasil linieritas, larutan baku β-karoten murni mempuyai nilai r sebesar 0,9999 atau
mendekati nilai 1. Hal ini menunjukkan bahwa luas puncak yang terdeteksi oleh HPLC dan konsentrasi
larutan mempunyai koefisien korelasi baik dan dapat digunakan untuk penelitian (tabel 1).

38

Gambar 1. Regresi linier β-karoten murni
Dari HPLC terhadap larutan standar betakaroten murni pada λmax dengan detektor PDA,
hasilnya terlihat sebagai berikut (tabel 2).
Tabel 2. Larutan standar β-karoten murni
dengan Luas Area Di Bawah Kurva dan
Waktu Retensi
Konsentrasi β-karoten
(ppm)
0,05
0.075
0,10
0,25
0,50
Konsentrasi β-karoten
(ppm)
1,00
2,50

Waktu Retensi
(menit)
8.543
8.527
8.535
8.528
8.523
Waktu Retensi
(menit)
8.512
8.472

Luas Area Di
Bawah Kurva
4.944,28
7349.69
10015.71
30344.85
55764.56
Luas Area Di
Bawah Kurva
119758.78
305903.62

Penentuan kadar β-karoten menggunakan HPLC diperoleh melalui perbandingan waktu
retensi dan luas area di bawah kurva kromatogram larutan standar β-karoten murni dengan
kromatogram sampel buah patikala. Pengujian sampel dilakukan 2 kali (duplo). Hasilnya, diperoleh
pada pengujian pertama, waktu retensi buah patikala sebesar 8.564 menit, seperti pada kromataogram
berikut :

Gambar 2. Kromatogram 1 analisis kadar β-karoten buah patikala.

39

Sedangkan pada pengujian kedua, diperoleh waktu retensi sebesar 8.597 menit, hasilnya dapat
dilihat pada kromatogram berikut :

Gambar 3. Kromatogram 2 analisis kadar β-karoten buah patikala
Dari hasil pengujian tersebut, kadar β-karoten pada buah patikala asal dari Pangandaran
(Jawa Barat) sebesar 0.1 ppm atau 10 mg/100 g, sedangkan kebutuhan β-karoten perhari adalah 5 - 6
mg/100 g. Sehingga disimpulkan bahwa mengkonsumsi buah patikala sebesar 50 gram per hari sudah
dapat memenuhi kebutuhan β-karoten harian. β-karoten pada buah patikala lebih tinggi kadarnya dari
β-karoten yang terdapat pada talas ungu (asal Pontianak).
KESIMPULAN DAN SARAN
Simpulan menyatakan jawaban dari hipotesis dan/atau tujuan penelitian yang telah
Konsentrasi β-karoten yang terdapat pada buah patikala (Etlingera elatior (Jack) R.M. Smith) yang
berasal dari Pangandaran (Jawa Barat) sebesar 10 mg/100 g sampel.
SARAN
Setelah melakukan penelitian analisis uji kadar β-karoten pada buah patikala sebagai alternatif
sumber vitamin A dan antioksidan disarankan melakukan penelitian lanjutan tentang :
a. perbandingan kadar β-karoten dari buah patikala yang berasal dari beberapa daerah, mengingat
adanya perbedaan warna buah patikala dari masing-masing daerah penghasil buah tersebut.
b. Membuat sediaan buah patikala dalam bentuk serbuk yang akan dikembangkan menjadi
minuman kesehatan.

DAFTAR PUSTAKA
Ahmad AR., 2017, Penetapan kadar fenolik dan flavonoid total ekstrak metanol buah dan daun
patikala, Pharm Sci Res !SSN 2407-2354, april 2015 (vol 2 no.1), Lab farmakognosi fak
farmasi UMI Makassar
Andarwulan, N. dan Koswara, Sutrisno. 1992. Kimia Vitamin. Rajawali Press.
Anonim. 1979. Farmakope Indonesia. Edisi III. Jakarta. Departemen Kesehatan Republik Indonesia
Cappuccino, J.C. and N. Shjerman, 1987, “Microbiology: Laboratory Manual”, The Benjamin
Cummings Publishing Company, Inc.
Fadel, M., 2016, Daya Hambat ekstrak buah patikala terhadap pertumbuhan Staphylococcus aureus,
Skripsi, Universitas Hasanuddin, Makassar.
Kristianingrum S, 2010, Tinjauan Berbagai Metode Analisis Karoten dalam Bahan pangan, Prosiding
Seminar Nasional penelitian, Pendidikan, dan Penerapan MIPA, Fakultas MIPA, Universitas
Negeri Yogyakarta.

40

Mangunsong S., et.all., 2019, Penentuan β-Karoten Dalam Buah (Daucus Carota) Secara
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi ( U-HPLC), AcTion Journal, P-ISSN : 2527-3310 E-ISSN
: 2548-5741, Volume 4, Nomor 1
Yenni, F.N., dkk, 2017, Uji anti mikroba hasil fraksinasi ekstrak etanol daun patikala terhadap
beberapa mikroba uji , Journal.uin-alaudidin.ac.id, Makassar.