Artikel Penelitian Majalah Kesehatan Pharmamedika 2013.
Vol 5 No.
Pengaruh Ekstrak Etanol Pegagan (Centella asiatica ) Terhadap Volume Hippocampus Tikus (Rattus norvegicu.
Pasca Stres Kronik Yenni Zulhamidah1*.
Nanang Wiyono2.
Dwi Cahyani Ratna Sari3 .
Ginus Partadiredja4.
Departement of Anatomy.
Faculty of Medicine.
YARSI University.
Jakarta Departement of Anatomy.
Faculty of Medicine.
Sebelas Maret University .
Surakarta Departement of Anatomy.
Faculty of Medicine.
Gadjah Mada University.
Yogyakarta Departement of Physiology.
Faculty of Medicine.
Gadjah Mada.
University Yogyakarta *Korespondensi : Email : yenni.
zulhamidah@yarsi.
ABSTRACT
Background.
Chronic stress caused by restraint stress induces an increase in corticosterone .
that result decreased hippocampal vollume.
Centella asiatica has long been used for various neurological disturbances in Southeast Asian countries.
Aims.
The research aims to investigate the effects of ethanol extracts of Centella Asiatica to prevent the decrease of hippocampal vollume after chronic stress.
Methods.
Thirty male adult rats (Sprague Dawle.
with body weight of 250-350 gram was randomly subdivided into six groups of treatments: Nonstress control group was given 2% Pulvis Gummi Arabicum (PGA).
Stress control groups( PGA 2 %), groups treated with fluoxetine 10mg/kgbw/day , and Ca150.
Ca300.
Ca600 containing ethanol extracts of Centella asiatica with doses 150 mg/kgbw/day, 300 mg/kgbw/day, 600 mg/kgbw/day a, respectively followed by restraint stress.
After 21 days of stress, rats underwent Morris Water Maze test for 6 days, perfused, and hippocampus was collected for histological processing.
Toluidine blue staining is used to asses the estimation of hippocampal volume.
Results.
The estimated hippocampal volume were 3.
1512 A 1.
, 2.
4736 A 0.
, 2.
7018 A 1.
(Ca.
, 2.
7405 A 1.
19 (Ca.
, 2.
2678 A 0.
82 (Ca.
5818 A 0.
70 (Fluoxetin.
Statistic test showed that there were no significant diferrence between stress control group and groups treated .
Conclusion.
There is no the significant effects of Ethanol extracts of Centella Asiatica to prevent the decrease of hippocampal vollume after chronic stress.
Key words : Centella asiatica .
Restraint stress.
Hippocampal volume.
Hippocampus Pendahuluan Salah satu masalah kesehatan utama dimasa sekarang ini adalah stress.
Stres dapat berupa stres akut maupun stres kronik yang keduanya dapat memberikan dampak dalam jangka waktu panjang (Mc Ewen et al.
, 1.
Stres kronik adalah stres yang berlangsung lama yang dapat diakibatkan oleh stres eksternal dalam kehidupan.
(Kubera et al.
Dampak stres kronik diatur melalui Aksis HPA .
ypothalamus, kelenjar pituitaria dan kelenjar adrena.
Sekresi ACTH oleh kelenjar pituitaria yang dipacu oleh hypothalamus, akan memacu korteks kelenjar adrenal untuk .
(Anisman dan Merali, 1.
Paparan glukokortikoid dalam jangka waktu lama atau stres kronik pada hippocampus akan menyebabkan disfungsi hippocampus, kematian neuron .
, dan atrofi hippocampus Apoptosis sel hippocampus yang terlalu cepat dan banyak akan mengakibatkan terganggunya pembentukan memori dan proses belajar (Lee et al.
, 2.
Berdasarkan pentingnya peran hippocampus maka perlu tumbuhan yang harganya lebih murah dan berkhasiat mencegah dampak stres.
Salah satu neuroprotektif terhadap kognisi dan neuron hippocampus adalah pegagan (C.
(Madhyastha et al.
, 2.
Tumbuhan pegagan merupakan tanaman obat yang banyak digunakan untuk pengobat di Asia Tenggara.
Majalah Kesehatan Pharmamedika 2013.
Vol 5 No.
terutama pengobatan kulit seperti wound healing, leprosy, lupus, varicose ulcers, eczema dan psoriasis, dan selain itu juga digunakan untuk mengobati stress.
Triterpenoid dan saponins yang terdapat dalam tumbuhan tersebut merupakan kandungan senyawa aktif yang bertanggung jawab secara famakologi (Gohil, 2.
Berdasarkan hal tersebut diatas perlu untuk mengetahui pengaruh pegagan terhadap volume hippocampus pascastres Material dan Metoda Penelitian Pembuatan Ekstrak Simplisia pegagan berasal dari CV Merapi Farma Herbal Yogyakarta berupa bahan kering sebanyak 1 Kg diekstraksi menggunakan prosedur maserasi dengan pelarut etanol 70% di LPPT Unit i UGM untuk mendapatkan 100 gram ekstrak etanol pegagan.
Pada penelitian ini akan digunakan ekstrak etanol pegagan dengan dosis yaitu 150, 300, dan 600 mg/kg BB dengan konsentrasi 30,60 dan 120 mg/ml.
Ekstrak uji ditimbang berdasarkan konsentrasi dosis masing-masing, kemudian disuspensikan dengan Pulvis Gummi Arabicum (PGA) 2%.
Penentuan volume pemberian ekstrak etanol pegagan dengan rumus:
Volume pemberian .
= Dosis .
g/kg BB) x Berat Badan .
Konsentrasi .
g/m.
Hewan Percobaan Subyek penelitian adalah tikus Spraguedawley jantan dewasa dengan berat badan berkisar antara 250-350 gram yang diperoleh dari Badan Pengawas Obat dan Makanan (BPOM) Jakarta.
Tiga puluh ekor tikus putih galur Sprague Dawley dewasa jantan dibagi secara random dalam 6 kelompok perlakuan.
Kelompok kontrol nonstres hanya di beri PGA Kelompok kontrol stres diberikan PGA 2% dengan perlakuan restraint stres.
Kelompok Ca150 diberi ekstrak etanol pegagan dosis 150mg/kgBB/hari dengan perlakuan restraint Kelompok Ca300 di beri ekstrak etanol pegagan dosis 300mg/kgBB/hari dengan Artikel Penelitian perlakuan restraint stres.
Kelompok Ca600 di 600mg/kgBB/hari dengan perlakuan restraint Kelompok fluoksetin diberi fluoksetin 10mg/kgBB/hari dengan perlakuan restraint Penentuan Volume Hippocampus Setelah perlakuan 21 hari, tikus diterminasi dengan perfusi dan diambil hippocampusnya dan kemudian dibuat blok parafin jaringan hippocampus.
Blok parafin yang berisi jaringan hippocampus disayat secara koronal setebal 3 AAm menggunakan rotary microtome.
Sesuai dengan teori stereologi, pasangan sayatan pertama diambil secara acak kemudian pasangan sayatan berikutnya diambil dengan interval 200 sayatan, sampai akhir sayatan yang mengandung Setiap ditempelkan pada slide yang telah di-coating, dan dikeringkan secara vertikal pada suhu Setelah kering, slide jaringan di letakan di slide warmer pada suhu 37AC dengan posisi horizontal selama satu malam dan disimpan dalam kotak preparat pada suhu ruang sebelum Semua (Howard dan Reed, 1.
Penentuan menggunakan metode Cavalieri (Howard dan Reed, 1.
, dengan cara menggunakan sayatan pada slide yang diwarnai toluidine blue.
Kemudian dilengkapi dengan kamera (Optila.
dan foto jaringan di gabungkan dengan program Adobe Photoshop CS4 Extended di komputer.
Selanjutnya digabungkan di buat grid dengan ukuran 1 cm dan titik pertemuan grid yang berada di daerah hippocampus dihitung dengan program Adobe Photoshop CS4 Extended, maka di dapatkan nilai P.
Nilai volume hippocampus didapatkan dengan rumus (Janhke, 2.
: V= (PutN) / n.
: Volume Hippocampus .
m ).
P : Jumlah pertemuan titik yang terdapat di daerah hippocampus, u : luas area yang diwakili setiap titik .
01mm ), t : Ketebalan sayatan.
N : Total jumlah serial sayatan hippocampus, n : Jumlah sayatan yang diambi.
( Gambar 1 ).
Artikel Penelitian Majalah Kesehatan Pharmamedika 2013.
Vol 5 No.
Gambar 1.
Foto mikrograf CA1-CA3 hippocampus dengan pewarnaan toluidine blue, terlihat (Perbesaran 100.
Hasil dan Diskusi Berdasarkan hasil rerata estimasi volume hippocampus (CA1-.
pada Gambar 2, kelompok kontrol non stres didapatkan volume hippocampus berada pada pada tingkat tertinggi dibandingkan kelompok yang lain.
Pada kelompok kontrol stres, terlihat volume hippocampus berada pada tingkat terendah dibandingkan dengan kelompok yang lain.
Ini menandakan stres kronik dapat menurunkan volume hippocampus.
Pada kelompok pegagan dosis 150 mg/kgBB, 300 mg/kgBB (Ca 150 dan Ca .
dan fluoksetin, terlihat adanya kemampuan zat aktif pegagan dan fluoksetin mampu melindungi dari stres sehingga dapat mencegah penurunan volume hippocampus.
Pada kelompok pegagan dosis 600 mg/kgBB, volume hippocampus terlihat rendah (Tabel 1 dan Gambar .
Ada kemungkinan karena pegagan pada dosis ini hanya mampu melindungi dari stres pada awalnya namun diduga terjadi toleransi dan menimbulkan efek neurotoksik (Omar et al.
, 2.
yang menyebabkan penurunan volume hippocampus.
Setelah diuji ANOVA satu jalur didapatkan estimasi volume hippocampus tidak ada Tabel 1.
Volume hippocampus pada CA1-CA3 hippocampus .
erataASD) Estimasi volume hippocampus .
m ) Kontrol non stres 1512 A 1.
Kontrol stres 4736 A 0.
Ca 150 7018 A 1.
Ca 300 7405 A 1.
Ca 600 2678 A 0.
Fluoksetin 5818 A 0.
Majalah Kesehatan Pharmamedika 2013.
Vol 5 No.
Rerata Estimasi Volume Hippocampus
Artikel Penelitian Kontrol
non stres
Kontrol
CA 150
CA 300
CA 600
Fluoxetin Gambar 2.
Grafik rerata estimasi volume hippocampus .
erataASD).
Kesimpulan Berdasarkan hasil penelitian dapat diambil kesimpulan bahwa pemberian ekstrak etanol pegagan tidak dapat menghambat secara signifikan penurunan volume hippocampus pascastres kronik.
Ucapan Terima Kasih Penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada dr.
Nanang Wiyono.
MKes yang telah bekerja sama dalam penelitian ini, dr.
Dwi Cahyani Ratna Sari.
Kes.
PA(K) dan dr.
Ginus Partadiredja.
Sc.
Ph.
AIFM selaku pembimbing.
Dan penulis juga mengucapkan terima kasih kepada Yayasan YARSI yang telah membiayai penelitian ini.
Daftar Pustaka